Tam plazmada fibrinojen yoğunluğundaki artışın granülositlerin mikrobisidal aktiviteleri üzerine etkisi

Abstract

50 14.ÖZET Fibrinojenin fagositler ve çeşitli patojen mikroorganizmalar ile etkileşimin moleküler düzeyde pek çok ayrıntısının ortaya konmuş olmasına karşın bu et kileşimin konakçı yararına mı yoksa parazit yararına mı olduğu konusunda görüş birliğine varılamamıştır. Bu çalışma akut faz reaksiyonu sırasında fibrinojen yoğunluğundaki artışın organizma yararına bir fizyolojik amacının olması gerektiği hi potezinden hareketle yapıldı. Biz, in vitro bir yöntem kullanarak normal plazma ortamında akut fazdaki gibi fibrinojen yoğunluğundaki artışın PMNL Merin mikrobisidal aktiviteleri üzerine etkisini araştırdık. Fb'in fagositik öldürme üzerine etkisini araştıran önceki çalışmalar ya yüzey fagositozu yöntemiyle ya da fizyolojik tuz süspasiyonları içinde gerçekleştirilmiştir. Bu nedenle bizim çalışmamız deney koşullarımızın özgüllüğü bakımından ilktir. Deneylerimizde fagosit olarak insan PMNL'leri, mikroorganizma olarak S.aureus, S.pneumoniae, E.aerogenes ve C.albicans kullanıldı. Fagositoz ve öldürme deneyleri Fb yoğunlukları dışında gerek volüm, gerekse içerik bakımından aynı deney süspansiyonlarını içeren steril, silikonla kaplanmış cam tüpler içinde gerçekleştirildi. I no.lu tüplere Fb eklenmedi. II no. lu tüplere 2 mg/ml, III no.lu tüplere 8 mg/ml Fb eklendi. Kısa bir süre (5 dakika) PMNL 'lerin opsonize mikroorganizmaları fagosite etmelerine izin verildi. Yutulmamış mikroorganizmalar bir seri santrifüj ile uzaklaştırıldı ve yutulmuş mikroorganizmaları içeren PMNL'ler 37°C'de plazma ortamında yeniden inkübe edildi. 30. ve 60. dakikalarda (C.albicans için ayrıca 120. dakikada) her deney tübü için canlı bakteri sayısındaki azalma öldürme indeksi ola rak ifade edildi. Mikroorganizma türü göz önüne alınmadan yapılan değerlendirmede tüpler arasında PMNL'lerin fagosite ettiği mikroorganizma sayıları açısından anlamlı fark yoktu.51 Öldürme indeksleri yönünden karşılaştırma yapıldığında ise, 2 mg/ml fib- rinojen eklenen tüplerdeki öldürme fibrinojen eklenmemiş olanlara göre 30. dakikada %8.0, 60. dakikada %9.9 daha fazla idi (p<0.001) 8 mg/ml Fb eklenen II no.lu tüplerdeki öldürme Fb eklenmeyen I no.lu tüplere göre 30. dakika da %7.7, 60. da kikada %9.2 daha fazla idi (sırasıyla p<0.05, p<0,01). II ve III no.lu tüpler arasında öldürme indeksleri yönünden fark yoktu. Mikroorganizmalar arasında Fb yoğunluğu artışına bağlı olarak öldürme in- deksindeki en büyük artış (60.dakikadaki değerlere göre) %16.2'lik artışla S.pneumoniae da görüldü. Bunu sırasıyla %14.2 ile C.albicans, %10.8 ile E.aerogenes izledi. S. aureus için Fb eklenen II ve III no.lu tüplerdeki PMNL başına öldürülen bakteri sayıları miktar olarak Fb eklenmeyen I. no.lu tüplerdekinden daha fazla (sırasıyla 13.5, 11.2 ve 10.4 bakteri / PMNL) olmakla birlikte öldürme indeksleri açısından aralarındaki fark istatistiksel olarak anlamsızdı. PMNL'lerin öldürme indekslerinin büyüklüğüne göre mikroorganizmaların sıralaması; S.pneumoniae > E.aerogenes > S.aureus > C.albicans şeklindedir. 60 da kikalık inkübasyon sonunda en yüksek öldürme indeksi %80.5±1.8 ile 8mg/ml Fb ek lenen III no.lu tüpte S.pneumoniae'ya karşı en düşük değer %21.9±2.3 ile Fb ek lenmeyen I no.lu tüpte C.albicans'a karşı saptandı. Sonuç olarak plazmada akut fazdaki gibi Fb yoğunluğu artışı granülositlerin mikrobisidal aktivitesini artırmaktadır ve 2 mg/ml'den daha fazla bir artış bu etkiyi değiştirmemektedir.