Roskovitin ve insülin benzeri büyüme faktörü-1`in sıçan karaciğerinde oluşturulan iskemi-reperfüzyon hasarının subakut dönemi üzerine etkileri

Abstract

Hepatositlerinapoptozis yolu ile ölümü, karaciğer iskemi-reperfüzyon (I-R) hasarındahem akut hem desubakut dönemde gösterilmiştir. Bununla birlikte, apoptozisin I-Rhasarında oynadığı rol henüz tam olarakortaya konulamamıştır. Bu çalışma ,apoptozisin I-R hasarının subakut dönemindeki rolünüve roskovitinile insülin benzeribüyüme faktörü-1'in (IGF-1) bu hasar üzerindeki etkilerini araştırmak amacı ileyapıldı. IGF-1 (n=8) ve roskovitin (n=8) verilen sıçanların karaciğerlerinin sağ lobları60 dakika süre ile iskemiye uğratıldıktan sonra, 24 saat süre ile reperfüzyonabırakıldı. Doku hasarının değerlendirilmesinde serum alanin aminotransferaz (ALT),aspartat aminotransferaz (AST), doku myeloperoksidaz (MPO)düzeyleri ölçümü vehistolojik inceleme kullanıldı. Ölü hepatositler tripan mavisi boyaması ilebelirlendi.Apoptotik hepatositler ise hazırlanan kesitlerin M30 monoklonal antikoru ileboyanması esasına dayalı immüno histokimyasal yöntem kullanaılarak belirlendi.Apoptotik ve ölü hepatositlerin periportal ve perisantral alanlarda yoğunlaştıklarıizlendi. Roskovitin uygulanan grup ile kontrol grubu karşılaştırıldığında apoptotik(P<0,005) ve ölü hepatosit sayılarında (P=0,055) azalma olduğu izlendi.Roskovitingrubunda ALT (ortalama değeri;78,8 U/L), AST (ortalam değeri; 445 U/L) ve MPO(ortalama değeri; 1,73 IU/g yaş doku) değerlerinin kontrol grubuna göre (ortalamdeğerler; ALT için 335,7 U/L, AST için 908,2 U/L ve MPO için 3 IU/g yaş doku)belirgin şekilde azaldığı saptandı (P< 0,05). IGF-1 uygulanan grupta ise ALT ve ASTdüzeylerinde kontrol grubuna göre değişiklik saptanmazken MPO düzeylerindebelirgin olarak artış gözlendi (P< 0,005). Bu çalışma ile I-R'ye bağlı karaciğerhasarının oluşumunda hepatosiıt apoptozisinin de rol aldığı ve Roskovitin uygulamasıile bu hasarın önlenebileceği sonucuna varıldı.

Apoptotic hepatocyte death has been observed during the acute and subacutephases of reperfusion period after liver ischemia. However, effects of this process onischemia-reperfusion (IR) injury are still unclear. This study was designed toinvestigate the role of apoptosis on subacute phase of the liver IR injury and todetermine the effect of roscovitine and insulin-like growth factor-1 (IGF-1) on thisprocess. Rat livers pretreated with IGF-1 (n=8) and roscovitine (n=8) received 60min. Right lobe ischemia followed by 24 h reperfusion. Tissue injury was evaluatedwith serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST),tissue myeloperoxidase (MPO) measurements and histological examination. Deadhepatocytes were determined with trypan blue dye test. Apoptotic hepatocytes wereevaluated immunohistochemically insection stained with M30 monoclonal antibody.Apoptotic and dead hepatocytes werw detected mainly in periportal and pericentralareas. Roscovitine treatment decreased both apoptotic (P<0,055) and deadhepatocyte counts compared to controls (P=0,055). ALT (mean level; 78,8 U/L forroscvitine group), AST (mean level; 445 U/L for roscovitine group) and MPO (meanlevel; 1,73 IU/gr wet tissue) levels were significantly decreased compared to control(mean levels; 335,7 U/L for ALT, 908,2 U/L for AST and 3 IU/gr wet tissue for MPO)(p<0,05). IGF-1 treatment did not cause differences on ALT and AST levelscompared to control group. Although, MPO levels were significantly increasedcompared to control group (P<0,005). This study indicates that hepatocyte apoptosismay play a role in the development of IR injury of the liver. Administration ofroscovitine may be beneficial in preventing this injury.