Deneysel UVB ışınına bağlı korneal hasar modelinde cıtıcolıne içeren damlanın antioksidan mekanizmalar üzerinden yara iyileşmesine etkisinin ve hücre sağ kalımındaki rolünün klinik ve histopatolojik olarak araştırılması

Abstract

Amaç: Ultraviyole B (UVB) hasarına bağlı fotokeratit modelinde citicoline tedavisininoksidatif hasar ve inflamasyon mekanizmaları üzerine koruyucu etkisini incelemek.Gereç ve Yöntem: Korneal oksidatif hasar ratların , 560 μW / cm2'de UVB ışınınamaruz kalması ile oluşturuldu. 30 adet ratın sol gözleri çalışmaya alındı ve denekler sham ,citicoline ve tedavi grubu olmak üzere 3 gruba ayrıldı. Sham ve tedavi grubuna UVB hasarmodeli oluşturuldu. Tedavi ve citicoline grubundaki ratlara hasar modeli oluşturulmadan 1 günönce başanarak citicoline damla günde 3 kez 7 gün süreyle damlatıldı. Tüm deneklerin 3. ve 8.Gün epitel defekti ve opasifikasyon (OP) değerlendirilmesi amacıyla ön segment (ÖS)fotoğrafları çekildi. 8. gün denekler sakrifiye edildi ve alınan kornealar histoloji , biyokimya vegenetik laboratuvarında değerlendirildi.Bulgular: Tedavi ve sham grubunun epitel defektleri karşılaştırıldığında, tedavigrubunda ilk vizitten itibaren daha az epitel defekti oluştuğu ve epitel iyileşmesinin daha hızlıolduğu görüldü (p:0.038 , p:0,013). Deney süresince korneal OP tedavi grubunda sham grubunagöre klinik olarak anlamlı olacak şekilde daha az olduğu görüldü ( p: 0.037 ). HP incelemede;epitel kaybı, vaskularizasyon, ödem, inflamasyon , epitelyal proliferasyon tedavi grubundasham grubuna göre daha azdı (p< 0.001). Konfokal mikroskop ile yapılan immün floresanincelemede kaspaz 3 , MMP-2, MMP-9 boyamalarda tedavi grubunda sham grubuna göreanlamlı fark vardı. VEGF, IL1b ve TGFb gen ekspresyon analizinde tedavi grubundainflamasyon markerları sham grubuna göre daha düşüktü (p<0.05, p< 0.01, p:<0.01).Biyokimyasal incelemelerde Malondialdehit (MDA) , glutatyon ( GSH) , süperoksit dismutaz( SOD) düzeyleri incelendi . GSH , SOD tedavi grubunda , sham grubuna oranla daha yüksekbulundu ( p<0.05 , p<0.05) . MDA düzeyi shame grubunda diğer gruplara göre daha yüksekti (p<0.05).Sonuç: Citicoline tedavisinin birçok dokuda antioksidan aktiviteyi arttırdığı literatürdebelirtilmiş ancak kornea dokusunda yara iyileşmesi üzerine etkisi henüz gösterilmemiştir.Çalışmamızda citicoline tedavisinin UVB korneal hasarı sonrası oksidatif stresin baskılamasıve iflamasyon kontrolü açısından etkili olabileceğini gösterildi.

Purpose: The aim of the present study was to investigate the protective effectsciticoline on UVB radiation–induced corneal oxidative damage in rat modelMaterials and Methods: Corneal oxidative damage was induced by exposure toUVB radiation at 560 μW/cm2. The left corneas of 30 albino rats were included in the study.The animals were divided three equal groups; Shame group, Citicoline group, and treatmentgroup. The healthy corneas of 10 randomly selected animals were also considered as healthygroup. To induce disorders in the corneal tissues, the eyes of the animals in shame and treatmentgroups were exposed to UVB irradiation. Citicoline ophthalmic solution was instilled in rat eyeimmediately before UVB-exposure and for the following 7 days every 8 hours starting 1 hourafter exposure. Anterior segment corneal photographs were taken to evaluate epithelial healing,opacification of all subjects on days 3 and 8. After the last visit on day 8, the animals weresacrificed and their corneas were removed from limbus border. The removed corneas were sentto the histology laboratory , biochemistry and genetics.Results: When the epithelial defects of the treatment and sham groups werecompared, it was observed that less epithelial defects were formed and epithelial healing wasfaster in the treatment group from the first visit (p:0.038 , p:0,013). Corneal opacification wasless in the treatment group than in the shame group ( p: 0.037 ). İn the histopathologicalexamination epithelial loss, vascularization, edema, inflammation, epithelial proliferation wereless than in the shame group (p< 0.001). Immunofluorescence examination with confocalmicroscopy showed a significant difference in caspase 3, MMP-2, MMP-9 staining comparedto shame group. In VEGF, IL1b and TGFb gene expression analysis, inflammation markerswere lower in the treatment group than in the sham group (p<0.05, p< 0.01, p:<0.01).Malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) levels wereexamined in biochemical examinations. GSH and SOD were higher in the treatment group thanin the sham group (p<0.05 , p<0.05) . MDA level was higher in shame group than other groups( p<0.05).Conclusions: It has been reported in the literature that Citicoline treatment increasesantioxidant activity in many tissues. However, its effect on wound healing in corneal tissue hasnot yet been demonstrated. In our study, it was shown that citicoline treatment may be effectivein suppressing oxidative stress and controlling inflammation after UVB corneal injury