Trinitrobenzensülfonik asit ile oluşturulan deneysel kolit modelinde quercetin kullanımının otofajik sürece etkisi

Abstract

Ülseratif kolit ve Crohn hastalığını kapsayan inflamatuvar bağırsak hastalıkları (İBH);son yıllarda dünya çapında insidansı gittikçe artan, kronik ve tekrarlayan inflamatuvar birbozukluktur. Bu çalışmada, 2,4,6 trinitrobenzen sülfonik asit (TNBS) ile kolit oluşturulmuşşıçanların kolon dokusunda, quercetin kullanımının otofajik süreç üzerindeki etkisi ile kolondokusunda meydana gelen histopatolojik hasarları önleyici/azaltıcı rolü araştırıldı.Bu amaçla 24 adet Wistar Albino sıçandan rastgele 3 grup (Kontrol, kolit vekolit+quercetin) oluşturuldu. Kolit indüksiyonu; 24 saat öncesinde aç bırakılmış kolit vekolit+quercetin grubu deneklere, 0,25 ml %30 luk etanol içerisinde hazırlanmış, 25 mgTNBS'in intrarektal yoldan verilmesiyle gerçekleştirildi. Kolit indüksiyonundan hemen sonrabaşlayarak 7 gün boyunca, kolit+quercetin grubu deneklerine, intragastrik yoldan 100mg/kg/gün quercetin verildi. Deneklerin günlük olarak vücut ağırlığı ve dışkı takibi yapıldı.Işık mikroskobik incelemeler (mikroskobik skor, Goblet hücre sayısı, mast hücre sayısı,morfometrik ölçümler) ile kolon histopatolojisinin yanı sıra, mukozal Beclin-1 ve p62immünoreaktivitesi ile de otofaji değerlendirildi.Deneklere TNBS'in rektal yoldan uygulanması; şiddetli diyare ile birlikte belirgin kilokaybı ile kendini gösteren kolit gelişimine neden oldu. Histopatolojik olarak kolon dokusundagözlenen; yaygın inflamatuvar hücre infiltrasyonu ile birlikte transmural inflamasyon, yer yerkanama alanları, yüzey epitelinde kayıp ve bozulmalar, Goblet hücre sayısında azalma,kriptlerde yapısal değişiklikler ve kript kaybı ile birlikte atlamalı olarak seyreden mukozalülserasyon ve erozyon nedeniyle, kolit grubunda yüksek mikroskobik hasar skoru tespit edildi.Ayrıca, baskılanmış otofaji nedeni ile mukozal Beclin-1 immünoreaktivitesinde azalma, p62immünoreaktivitesinde artış gözlendi. Quercetin tedavisi, kolon dokusunda ortaya çıkanhistopatolojik ve otofajik değişiklikleri önemli ölçüde önledi.Bu çalışmanın bulguları; quercetinin, TNBS ile indüklenen kolite bağlı olarak ortayaçıkan otofajik ve inflamatuvar değişiklikleri düzenlemek suretiyle, İBH gelişimini önlemedefaydalı olabileceğini göstermektedir.

Inflammatory bowel diseases (IBD) including ulcerative colitis and Crohn's disease, isa chronic and recurrent inflammatory disorder of the digestive tract and the incidence of IBDis increasing worldwide. In this study, the effect of quercetin on the autophagic process and itsrole in preventing / reducing histopathological damage in the colon tissue of rats treated with2,4,6 trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) were investigated.Twenty-four Wistar albino rats divided from randomly 3 groups (control, colitis andcolitis + quercetin). For the colitis induction, TNBS (25 mg) was prepared in 0.25 ml of 30%ethanol and then intrarectally was administered to fasted colitis and colitis + quercetin group ofanimals for 24 hours. Beginning immediately after the induction of colitis, intragastrically, 100mg/kg per day quercetin was given for 7 days. Following colitis induction, all rats weremonitored daily for body weight and stool consistency. At the end of the experiment, colontissues were removed and evaluated the colon histopathology by light microscopic examination(microscopic score, Goblet cell count, mast cell count, morphometric measurements), and theautophagy by immunohistochemically mucosal Beclin-1 and p62.Rectal administration of TNBS to rats was caused severe diarrhea accompanied bymarked weight loss. Histopathologically; transmural inflammation with diffuse inflammatorycell infiltration, occasional hemorrhagic areas, loss and deterioration of surface epithelium,decrease in number of Goblet cells, crypt distortion, crypt loss and patch-like ulceration wereobserved in colon of colitic rats. As a result, high microscopic damage score was determined in colitis group. As indicator of suppressed autophagy, we also shown that a decrease in mucosalBeclin-1 immunoreactivity and an increase in p62 immunoreactivity. Quercetin treatmentsignificantly prevented histopathological and autophagic changes in colon tissue of TNBSinducedcolitic rats.The findings of this study suggested that quercetin may be useful in preventing andtreatment of IBD by regulating autophagic and inflammatory changes in colon.