Deneysel retinal iskemi ve reperfüzyon oluşturulan kobaylarda vitamin E türevlerinin etkisi

Abstract

I. ÖZET Bu çalışmada iskemi-reperfüzyon sürecinde oksijen radikallerinin zararlı etkilerini engelleyen vitamin E türevlerinin, kobay retinasında oluşturulan iskemik hasarı önlemedeki etkinlikleri araştırılmıştır. Denekler, 400-600 gram ağırlığında erkek cins 80 adet sağlıklı pigmentli Guinea pig (kobay)'den oluşmuştur. Kobaylar her bir grupta 16 denek olacak şekilde 5 eşit gruba ayrılmıştır. Grup 1 (kontrol/noniskemik grup): Bu gruba hiçbir işlem yapılmamış, sadece normal değerlerin saptanması amaçlanmıştır. Grup 2 (iskemi/reperfüzyon grubu), grup 3 (alfa-tokoferol grubu), grup 4 (gama-tokoferol grubu) ve grup 5 [d-alfa- tokoferol polietilen glikol 1000 süksinat (TPGS) grubu]'e iskemi-reperfüzyon işlemi yapılmış ve grup sırasına göre serum fizyolojik, alfa-tokoferol, gama- tokoferol ve TPGS uygulanmıştır. Tüm deneklerin birer gözü kullanılmış olup, her bir gruptaki deneklerin yarısı biyokimyasal inceleme için, diğer yansı ise histopatolojik inceleme için kullanılmıştır. 2-5. gruptaki deneklerde retinal iskemi oluşturmak amacıyla, göz içi basıncı 150 mmHg olacak şekilde serum şişesi 204 cm yüksekliğe çıkartılarak tespit edilmiş ve bu yükseklikte 90 dakika süreyle tutulmuştur. 90 dakikalık iskemi sonrasında göziçi basıncı normal seviyeye düşürülmüş ve denekler 24 saat süreyle reperfüzyon ortamında bırakılmış ve gözler enükle edilmiştir. Çalışmamızda retinal doku malondialdehid (MDA) düzeyleri değerlendirildiğinde; her bir ilaç grubunun iskemi grubu ile karşılaştırmalarında ilaç grupları lehine istatistiksel anlamlılık saptanırken (p<0.0001), ilaç gruplarının birbirleri ile yapılan karşılaştırmalarda sadece alfa-tokoferolün TPGS grubuna göre istatistiksel olarak anlamlılık gösteren daha iyi koruma sağladığı saptanmıştır (p<0.0001). Retina glutatyon (GSH) düzeylerinde; gama-tokoferol grubunun iskemi grubuna göre anlamlı koruma sağlamadığı saptanmıştır (p=0.53). Alfa-tokoferol ve TPGS gruplarının iskemi grubuna göre anlamlı koruma sağladığı saptanırken kendi aralarında istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık saptanmamıştır (p=0.60). Çalışmamızda histopatolojik bulgular genel olarak değerlendirildiğinde; iskemi-reperfüzyon hasarına karşı, her üç ilaç grubunun iç retinal katlarda belirgin koruma sağladığı saptanırken bu korumanın dış retinal katlara gidildikçe azaldığı gözlenmiştir.Bu sonuçlar değerlendirildiğinde; MDA, GSH düzeyleri ve histopatolojik bulgularımız itibarı ile, akut iskemi-reperftizyona maruz kalan gözlerde, özellikle alfa-tokoferolde daha belirgin olmak üzere vitamin E türevleri lipid peroksidasyonunu ve retinal dokunun iç katlarında ödem formasyonu ve dejenerasyonu azaltmaktadır. Anahtar Kelimeler: Vitamin E, iskemi-reperfüzyon, retina.

H. ABSTRACT The purpose of this study is to determine protective role of vitamin E derivatives aganist oxygen radicals in guinea pig retina with ischemic injury. 80 male guinea pigs weighing 400-600 g were used and we divided them into 5 groups with randomly selected 16 guinea pigs. Group 1 (control/non-ischemic group) was not applied any procedure, only for the determination of normal values. Group2 (ischemia-reperftision group), group 3 (alpha-tocopherol group), group 4 (gamma-tocopherol group), group 5 [ d- alpha-tocopheryl polyethlene glycol 1000 succinate (TPGS) group] were applied ischemia-reperfusion and recevied serum physiologic, alpha-tocopherol, gamma- tocopherol and TPGS respectively. Only one of eye of guinea pigs were studied and halves of each group were used for biochemical analysis and other halves were used for histopathological analysis. Retinal ischemia was induced to group 2,3,4 and 5 by raising saline reservoir to a height of 204 cm there by increasing the intraocular pressure to 150 mmHg for 90 minutes. After 90 minutes of ischemia, intraocular pressure was lowered to normal levels and reperfiision was induced for 24 hours and then eyes were enucleated. By taking retinal tissue malondialdehyde (MDA) levels into consideration, MDA levels of the treatment groups were significantly better than the control group (p<0.0001). In the comparison of treatment groups only the protective effect of alpha-tocopherol was significantly better than TPGS group (p<0.0001). According to retinal glutathione (GSH) levels gamma-tocopherol did not have significant protective effect (p=0.53). Alpha-tocopherol and TPGS groups had significant protective effect but in the comparision of these two groups no statistically significant difference was determined (p=0.60). Histopathological analysis of each group indicated that treatment groups had significant protective effect in the inner layers of retinas but this effect worned in the outer layers of retinas. Our results suggest that according to MDA, GSH levels and histopathological changes in eyes that were induced to ischemia-reperfusion, vitamin E derivatives especially alpha-tocopherol can have protective role by decreasing lipid peroxidation, and edema formation and degeneration in the inner retinal layers. Key Words: Vitamin E, ischemia-reperfusion, retina.