Kan torbalarında saklanan kanlardan izole edilen eritrosit membranlarındaki inozitol fosfolipidlerin değişimi

Abstract

ÖZET Karı depolanması sırasında, eritrosit membranında yapısal değişiklikler meydana geldiği ileri sürülmektedir. Bundan dolayı bu çalışmada, CPDA-1 antikoagülanı içeren kan torbalarında 30 gün boyunca depolanan kanlardan izole edilen eritrosit membranlarında inozitol fosfolipidlerin zamana bağlı olarak değişimleri çalışıldı. İnce tabaka kromatografisi ile membranlardan elde edilen ekstraktlarda fosfatidilinozitol- 4,5-bisfosfat, fosfatidilinozitol-4-fosfat, f osf ati d i I inozitol, fosfatidik asit, fosfatidilserin, fosfatidiletanolamin ve fosfatidilkolin fosfolipidlerinin varlığı kanıtlandı. Her bir fosfolipidin 0. günden 30. güne kadar olan değişimleri inorganik fosfor üzerinden değerlendirildi. İnozitol fosfolipidlerinden fosfatidilinozitol-4,5-bisfosfat'da belirgin bir azalma gözlenirken, fosfatidilinozitol-4-fosfat ve fosfatidilinozitol'da belirgin bir artış saptandı (p<0.05). Diğer fosfolipidler fosfatidilserin ve fosfatidiletanolamin'de azalma, fosfatidilkolin'de ise artma gözlendi (p<0.05). Fosfatidik asitte ise fark bulunamamıştır. 30 gün boyunca depolanmış olan bu kanlardaki eritrosit membran peroksidasyonunda ise belirgin bir artış saptanmıştır (p<0.001 ). Fosfatidilinozitol-4,5-bisfosfat'daki azalma ve fosfatidilinozitol-4-fosfat ile fosfatidilinozitol'daki artmaya bağlı olarak, inozitol fosfolipidlerdeki fosforilasyon-defosforilasyon siklusunda defosforilasyona doğru kayma olduğu gözlenmiştir.

ABSTRACT It has been suggested that structural changes occur in the erythrocyte membrane during blood storage. In this study, we analysed the time- dependent changes in inositol phospholipids of erythrocyte membranes isolated from blood stored with CPDA-1 anticoagulant for 30 days in plastic bags. The presence of phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate, phosphatidylinositol-4-phosphate, phosphatidylinositol, phosphatidic acid, phosphatidylserine, phosphatidylethanolamine and phosphatidylcoline phospholipids was evaluated in the extracts obtained from the membranes via thin-layer chromatography. The variation in each phospholipid during the 30 days storage period was evaluated by using their inorganic phosphorus levels. Significant increases in phosphatidylinositol-4-phosphate and phosphatidylinositol phospholipids were observed, whereas there was a significant decrease in phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate (p< 0.05). As for the other phospholipids, phosphatidylserine and phosphatidylethanolamine decreased, but phosphatidylcoline increased (p< 0.05). There was no difference observed in the phosphatidic acid. In the blood stored for 30 days, there was a significant increase in erythrocyte membrane peroxidation (p< 0.05). Since we have been observed a decrease in phosphatidylinositol-4,5- bisphosphate and increases in phosphatidylinositol-4-phosphate and phosphatidylinositol, we could state that there was a tendency towards dephosphorylation in phosphorylation- dephosphorylation cyclus of inositol phospholipids. IV