Retinoik asit izomerlerinin beta-amiloid ile apoptozis oluşturulmuş primer hipokampal nöronlar üzerine etkisi

Abstract

ÖZET Bu çalışmada, kültüre edilen primer hipokampal nöronlarda amiloid p-peptid 25- 35 (AP25-35) tarafından oluşturulan apoptozisin, farklı konsantrasyonlardaki retinoik asit (RA) izomerleri tarafından önlenip önlenmediği araştırılmıştır. Retinoik asit izomerleri olarak tüm-trans retinoik asit (t-RA), 9-cis retinoik asit (9-c-RA) ve 13-cis retinoik asit (13-c-RA) kullanılmıştır. AP uygulanmasından 24 saat sonra, retinoik asit uygulanan ve uygulanmayan nöronlarda kromatin yoğunlaşması ve DNA fragmentasyonu ile karakterize edilen apoptotik nukleus oluşumu izlenmiştir. Ap, apoptotik nöron oranını kontrole göre %16' dan %81'e arttırmıştır (p<0.01). 0.01, 0.1 ve luM' lık konsantrasyonlardaki t-RA, AP tarafından oluşturulan apoptotik nöron yüzdesini, sırasıyla % 33, % 25 ve % 21' e düşürmüştür (tüm konsantrasyonlar için p<0.01). Aynı konsantrasyonlardaki 9-c-RA apoptotik nöron yüzdesini sırasıyla % 35, % 26 ve % 23'e düşürmüştür (tüm konsantrasyonlar için p<0.01). Benzer olarak 13-c-RA' de apoptotik nöron yüzdesini sırasıyla % 38, % 28 ve % 24' e düşürmüştür (tüm konsantrasyonlar için p<0.01). Sonuç olarak, retinoik asit izomerlerinin hipokampal nöronları AP25-35 ile indüklenen apoptozisten korumada önemli rol oynadığı söylenebilir. Anahtar Kelimeler: Apoptozis, retinoic asit, amiloid p-peptid, hipokampal nöronlar

ABSTRACT In this study, we investigated whether apoptosis which is induced by amyloid P- peptide 25-35 (AP25-35) is prevented by retinoic acid (RA) isomers in different concentrations in cultured primary hippocampal neurons. All-trans retinoic acid (ATRA), 9-cis retinoic acid (9-cRA) and 13-cis retinoic acid (13-cRA) were used as retinoic acid isomers. Apoptotic nuclei formation characterized by condensed chromatin and fragmented DNA was monitored in neurons treated with or without retinoic acid 24 hours after treatment with A3. AP increased the percentage of apoptotic neurons from 16 % in controls to 81 % (p<0.01). ATRA in concentrations of 0.01, 0.1 and 1.00 uM decreased the percentages of apoptotic neurons from 81 % in Af5 treatment to 33 %, 25 % and 21 %, respectively (p<0.01 for all concentrations). 9-cRA at the same concentrations decreased the percentages of apoptotic neurons from 81 % in AP treatment to 35 %, 26 % and 23 %, respectively (pO.01 for all concentrations). Similarly, 13-cRA at the same concentrations decreased the percentages of apoptotic neurons from 81 % in Ap treatment to 38 %, 28 % and 24 %, respectively (p<0.01 for all concentrations). Our results suggests that retinoic acid isomers may play an important role to protect neurons from AP25-35 -induced apoptosis. Keywords: Apoptosis, retinoic acid, amyloid P-peptide, hippocampal neurons