Prostaglandin EL (PGE1) analoğu misoprostol uygulanan gebe sıçan serviksinde matriks metalloproteinaz-3 (MMP-3) ve kollajen dağılımı

Abstract

Servikal olgunlaşma doğum için hayati önem taşıyan bir süreçtir.Klinikte, servikal olgunlaşmayı tetiklemek için kullanılan ajanlardan en yaygınıise sentetik bir prostaglandin E1 analoğu olan misoprostol'dür. Uterusserviksinin bağ dokusu; kollajenler, elastin, proteoglikanlar ve hyaluronikasitten ibaret tipik bir bağ dokusudur. Ekstraselüler matriks (ESM)'inyıkılması, termde servikal olgunlaşmada ve dilatasyonda çok önemlidir.Matriks metalloproteinazlar (MMP'ler)'ın bu olaylarda önemli rol oynadığıdüşünülür. Endopeptidazlar olan MMP'ler belirli ESM proteinlerini enzimatikyoldan sindirebilme yeteneğindedir. Günümüzde 28 tip MMP tanımlanmıştır.MMP-3'ün de dahil olduğu alt grup olan stromelizinler, kollajeni yıkımagötürebilir. MMP-3, çok sayıda ESM komponenti üzerindeki etkisinden dolayıservikste anahtar regülatör enzim olmaya güçlü bir aday olarakgörülmektedir.Araştırmada, Rattus norvegicus türü dişi ve erkek sıçanlarkullanılmıştır. Bir gece dişi/erkek oranı 2/1 olan kafeslerde bekletilenhayvanlara ertesi gün vajinal simir uygulanmıştır. Simiri sperm pozitif olansıçanlar gebeliğinin 0. gününde kabul edilmiştir. Çalışmalar için östrusta,gebeliğin 12,16, 20 ve doğum sonrası 0. günlerinde 5 kontrol; 12,16,20 vedoğum sonrası 0. günlere ait ve 1,5 ve 3,0 ?g misoprostol uygulanma dozunabağlı olarak da 2 farklı kategoride olmak üzere 8 deney grubuoluşturulmuştur.Çalışmamızda, gebelik süresinde ve termde sıçan serviksinin yenidenyapılanmasında prostaglandinlerin MMP'ler üzerinden ESM yapısını etkileyipetkilemedikleri araştırılmıştır. Bunun için oral olarak farklı dozlardamisoprostol uygulanan gebe sıçan serviksinde MMP-3'ün ve matrikste yaygınbulunan kollajen I ve IV'ün immunohistokimyasal olarak dağılımlarına kezatransmisyon elektron mikroskubu (TEM) düzeyinde ultrastrüktürel yapıdakideğişikliklere bakımıştır.Sonuç olarak, immünohistokimyasal bulgulardan çalışma gruplarındakollajen I proteininin lamina propriyada kuvvetli, kas çevresinde zayıfreaksiyon verdiğini gözledik. Aksine MMP-3 antikoru reaksiyonu laminapropriyada zayıf, kas çevresinde orta ve kuvvetli reaksiyon gösterdi. TEM'dedüşük doz misoprostolün yüksek doza göre fibril çapı, merkez ve periferfibriller arası aralık değerlerini önemlilik düzeyinde daha fazla etkilediğinigördük.Anahtar kelimeler; Sıçan, Servikal olgunlaşma, MMP-3, Kollajen I,Kollajen IV, Misoprostol,

Cervical ripening is a crucial process leading to delivery. In clinic themost common agent to trigger the cervical ripening is misoprostol which is asynthetic prostaglandin E1 analog. The connective tissue of the cervix uteriis a typical connective tissue consisting of collagen, elastin, proteoglycansand hyaluronic acid. The degradation of extracellular matrix (ECM) is veryimportant in term, cervical ripening and dilatation. Matrix Metalloproteinases(MMPs) are thought to play a critical role in these events. MMPs which aremembers of endopeptidases have the capability to digest ECM proteinsthrough enzymatic activity. 28 types of MMPs are defined at the present time.The sub group of stromelysins, which include MMP-3 are capable ofdegrading collagens. MMP-3 is considered to be a strong candidate as a keyregulator enzyme in cervix uteri due to its effect on many ECM components.In our study, female and male Rattus norvegicus rats were used. Ratswere kept in cages where female/male proportion was 2/1 for one night andnext day vaginal smear was performed. Female rats with sperm positivesmears were accepted to be on day 0 of pregnancy. For our study, 5 controlgroups were generated, in estrus cycle,12th, 16th, 20th days of pregnancy andpost partum 0 day; and 8 experimental groups were generated on the 12th,16th, 20th days of pregnancy and post partum 0 day using 1,5 and 3,0 ?gmisoprostol treatment.In our study, whether prostaglandins affect the ECM structure viaMMPs during pregnancy and remodelling at the rat cervix in term wasstudied. In order to perform this, the distributions of collagen type I and IV,which are extensively present in ECM, and MMP-3 were studied by means ofimmunohistochemistry in pregnant rat cervix which was exposed tomisoprostol at various dosages. Moreover, ultrastructural changes wereinvestigated by transmission electron microscopy (TEM).In conclusion, in our immunohistochemical results we observed thatcollagen I protein were expressed densely in lamina propria while it wasweak around the surroundly muscle. In contrast, the expression of MMP-3antibody were weak in lamina propria where it was intermediate and densearound the surrounding the muscle. Our TEM results revealed that the effectof low dosage misoprostol were more effective on fibril diameter, and on thedistance between central and peripheral fibrils when compared to highdosage misoprostol.Key Words; Rat, Cervical ripening, MMP-3, collagen I, collagen IV,Misoprostol