İn vitro sıçan mesane kasılmaları üzerine melatonin reseptörlerinin rolü

Abstract

Amaç: Bu tez çalışmasının amacı, in vitro mesane kasılmaları üzerine melatoninreseptörlerinin olası etkilerinin ve bu etkilerin meydana gelmesinde reseptör agonist ve antagonistininrollerinin araştırılmasıdır.Yöntem: Deneysel çalışmalar, Necmettin Erbakan Üniversitesi KONÜDAM Deneysel TıpAraştırma ve Uygulama Merkezi ile Necmettin Erbakan Üniversitesi Meram Tıp Fakültesi FizyolojiAnabilim Dalı Laboratuvarı'nda gerçekleştirildi. Çalışmada Wistar cinsi 5-6 aylık, 200–250 g arası 24adet dişi sıçan kullanıldı. Eter sedasyonunu takiben servikal dislokasyon yöntemi ile sıçanlar ötenaziedildi. Abdomen medyan hattan açılarak mesane çıkarıldı ve Krebs solüsyonu içine alındı. Mesaneboyun kısmından apex yönünde longitudinal bir kesi ile açılarak mesaneden vertikal yönde 2X10 mmebadında iki kas şeridi hazırlandı. Şeritler izole organ banyosundaki cam hazneler içerisindekidüzeneğe 1 g gerim uygulanarak yerleştirildi. Kas şeritlerine melatonin, melatonin reseptör agonist veantagonisti ve bunların çözücüleri kümülatif olarak uygulandı. 45 dakikalık bir uyum periyodunutakiben spontan kasılma gösteren bütün mesane şeritlerine 10-5 M asetilkolin (ACh) uygulanarakkasılmalar indüklendi. Kümülatif olarak agomelatin (10-8 M-10-3 M), melatonin (0.01 mM, 0.1 mM, 1mM, 2.5 mM) ve melatonin 2 reseptör antagonisti 4PPDOT (0.01 mM, 0.1 mM) uygulamaları yapıldıve genlik üzerinde oluşan etkiler kayıt altına alındı.Bulgular: Agomelatin 10-8 M-10-5 M doz aralığında uygulanmasıyla önemli bir etkioluşmazken, 10-4 M ve 10-3 M dozlarında istatistiksel olarak anlamlı bir inhibisyon gözlendi (p<0.01ve p<0.001, sırasıyla, n=7). Melatonin benzer şekilde, 0.01 mM ve 0.1 mM dozlarının ACh ileindüklenen mesane düz kas kontraksiyonları üzerine etkili olmadığı fakat 1 mM ve 2.5 mM dozlardakontraksiyonları kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde azalttığı belirlendi(p<0.001). 0,01 mM ve 0.1 mM 4P-PDOT ise 2 mM melatonin uygulanmasıyla oluşan inhibisyonugeri döndürmedi.Sonuç: Agomelatin ve melatonin in vitro sıçan mesane düz kas kontraksiyonları üzerindebelirgin inhibitör etki göstermektedir. Bu etkiler doz bağımlı olarak ortaya çıkmaktadır. Ancak 4P-PDOT in vitro sıçan mesane düz kas kontraksiyonlarını etkilememektedir. Bu da mesane kasılmalarıüzerindeki melatoninin oluşturduğu inhibisyonun muhtemelen melatonin 2 reseptörü aracılı olarakortaya çıkmadığını göstermektedir.Anahtar Kelimeler: Agomelatin; Melatonin; Mesane; Sıçan; 4P-PDOT.

Aim: The objective of this thes is was to investigate the possible effects of melatoninreceptors on bladder contractions in vitro and roles of agonist and antagonist in emergence of theseeffects.Method: Experimental studies were carried out in KONUDAM Experimental MedicineResearch and Application Center and the Laboratory of Physiology Department in Necmettin ErbakanUniversity. 24 female Wistar rats (5-6 mount age) weighing 200-250 g have been used in this study.Rats were euthanized by cervical dislocation after light ether sedation. The abdomen was opened bymedian line and the bladder was removed and taken into the Krebs solution. The bladder was openedwith a longitudinal incision in the direction of the apex from the neck to prepare two muscular stripsof 2x10 mm in the vertical direction. The strips were placed by applying 1 g of tension to theassembly in the isolated organ bath. Melatonin, melatonin receptor agonist and antagonist and theirsolubilizers were cumulatively applied to the muscles trips in organ bath. Following a 45-minute equalibrati on period, tonic contractions were induced by application of acethylcholin (ACh) at 10-5 Mconcentration. Agomelatin (10-8 M-10-3 M), melatonin (0.01 mM, 0.1 mM, 1 mM, 2.5 mM) and4PPDOT (a selective melatonin receptor 2 antagonist, 0.01 mM, 0.1 mM) were applied and the effectson contraction amplitudes were recorded.Results: Agomelatin had no effect between 10-8 M and 10-5 M level but there was significantinhibitory effect at the other doses (p<0.01 and p<0.001 respectively, n=7). Similarly, there was nosignificant effect on bladder smooth muscle contractions after application of 0.01 mM and 0.1 mMmelatonin concentrations, whereas melatonin administration both 1 mM and 2.5 mM significantlyinhibited the contraction compared to control (p<0.001). 4P-PDOT administration at 0.01 and 0.1 mMconcentrations failed to reverse the inhibition occured by 2 mM melatonin application.Conclusion: Agomelatin and melatonin have significant inhibitory effects on rat bladdersmooth muscle contractions in vitro. These effects are dose-dependent. However, 4P-PDOT does nothave a significant effect on rat bladder smooth muscle contractions. These results show that theinhibition of melatonin on bladder contraction is not mediated by melatonin 2 receptor.Keywords: Agomelatin; Bladder; Melatonin; Rat; 4P-PDOT.