Normal endometrium dokusunda nükleer faktör-kappa b` nin menstrüel siklus fazlarına göre ekspresyonunun değerlendirilmesi

Abstract

GİRİŞ ve AMAÇLARİnsan endometriumu her menstrual siklusta ve aynı zamanda erken dönem gebelikte temelinde endokrin-immün interaksiyonların olduğu, doku onarımı ve rejenerasyonu, inflamasyon, anjiyogenez, blastokist implantasyonunu içeren özel moleküler yolakların kontrolü altında siklik dönüşümler geçirir.Nükleer faktör-kappa B (NFκB) inflamasyon, immünite, hücresel adezyon, hücre çoğalması, apopitozis ve anjogenezis gibi olaylarda kilit rol oynayan bir transkripsiyon faktörüdür.Proinflamatuar genleri regüle etmek yanında menstruasyon ve implantasyon gibi inflanasyon proseslerinin rol oynaması muhtemel olan reprodüktif mekanizmalarla ilişkili olabilir.YÖNTEM ve GEREÇLERSağlıklı, herhangibir endometrial patoloji öyküsü olmayan kadınlardan elde edilmiş olan endometrial örnekler (n=31) üzerinde fosforile NFκB(p- NFκB ve total NFκB için immunohistokimyasal boyama yöntemleri kullanılarak menstrüel siklusun değişik fazlarında bu moleküllerin hücresel ekspresyonu endometrial glanduler epitel ve stromal hücrelerde araştırıldı. Boyanma intensiteleri HSCORE yöntemi kullanılarak semikantitatif olarak analiz edildi.İstatistiksel analizler One-Way ANOVA kullanılarak yapıldı.SONUÇLARİmmünolojik boyanma glanduler ve stromal hücrelerde fosfo-NFκB için daha çok nükleer olarak gerçekleşirken, total NFκB için boyanma yoğunluğu hem nükleer hem da stoplazmik olarak gerçekleşti. Glanduler hücrelerde NFκB fosforilasyonu geç proliferatif fazda en yüksek, geç seketuar fazda ise en düşük düzeyde saptandı(p<0.05). Geç proliferatif fazdaki boyanma yoğunluğu geç proliferatif fazda orta (mid) proliferatif faza göre (p<0.05), ve orta (mid) sekretuar fazda geç sekretuar faza göre istatistiksel anlamlı olarak daha fazlaydı (p<0.05).Endometrial stromal hücrelerde ise p-NFκB boyanma yoğunluğu orta (mid) sekretuar fazda geç sekretuar faza göre anlamlı olarak fazla saptandı (p=0.035).TARTIŞMAMenstrüal siklus boyunca östrojen ve progesteron erken proliferatif ve geç sekretuar fazlarda en düşük seviyelerinde izlenirler.Östrojen düzeyi en yüksek seviyesine geç proliferatif fazda ulaşır ve orta (mid) sekretuar fazda her iki streoid hormonun düzeyleri de yüksek seviyededir.Sonuçta NF-κB'ninendometrial epiteldeki ekspreyonunun steroid hormon düzeyleri ile bağlantılı olarak değiştiğini ortaya çıkardık.Ayrca NF-κB'nin siklusun mid sekretuar fazında artışı endometriumun implantasyona hazırlanması açısından anlamlı olabilir.İmplantasyonda önemli sitokinlerin ekpresyonunda NF-κB'nin rolü olduğu daha önceden ortaya çıkarılmıştı.Çalışmamıza özgü olarak çalışılan fosforile ve aktif formunun implantasyona hazırlanan endometriumda hem glandular hem de stromal dokuda artıyor olduğunun gösterilmesi bu açıdan özellikle önemlidir.

Objective: To investigate the differential regulation of Nuclear factor-kappa B (NFκB) as a transcription factor in human endometrium during different menstrual cycle phases.Design :Invitro laboratory study using human endometrial tissuesSetting: Yale University School of Medicine Department of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Sciences Research LaboratoriesPatients:Healthy adult human endometrial tissues at different menstrual cycle phases. Intervention(s):Endometrial tissues from healthy women were extracted and undergone immunostaining. Main Outcome Measure(s):Expression levels of NF-κB in human endometrium at different cycle phases with use of immunohistochemical staining for NF-κB, semiquantitative histological scoring (H-SCORE).Results:Immunostaining revealed that phospho-NFκB was mostly nuclear, while total NFκB was cytoplasmic and nuclear in both stromal and glandular cells. In glandular cells, NFκB phosphorylation was highest in the late proliferative (LP) phase, and lowest in the late secretory (LS) phase (p<0.05). Staining intensity was also significantly higher in late proliferative (LP) phase than mid-proliferative (MP) phase (p<0.05), and the midsecretory (MS) phase than the LS phase (p<0.05). In stromal cells, P-NFκB staining was significantly higher in the MS phase than the LS phase (p=0.035).Conclusion:In the menstrual cycle, both estrogen and progesterone are at their lowest levels during EP and LS phases. The observed changes in NfκB phosphorylation throughout the menstrual cycle appeared to flucuate in accordance with the steroid hormone changes, suggesting that NfκB in the endometrium is regulated in a cycle-dependent manner by estrogen and/or progesterone. Phosphorilated and active form of NF-κB is elevated in both glandular epitelial and stromal cells of the endometrium while preparing for implantation.