Hücre kültürü ortamında kalsiyum sinyali, apoptosis ve oksidatif stres değerleri üzerine mavi ışık (405 nm), amfenak ve melatoninin etkilerinin araştırılması

Abstract

Hücre Kültürü Ortamında Kalsiyum Sinyali, Apoptosis ve Oksidatif StresDeğerleri Üzerine Mavi Işık (405 nm), Amfenak ve Melatoninin EtkilerininAraştırılmasıYaşa bağlı maküla dejeneresansı (YBMD) gelişmiş ülkelerde yaşlılarda enönemli körlük nedenidir. YBMD patogenezi tam olarak anlaşılamamış bir hastalıkolup günümüzde etkin bir tedavi ve önlemi yoktur. Yaşlılık sonucu YBMDsebeplerinden birisi olan artan oksidatif stres sonucu maküladaki RPE ve progresifdejenerasyon oluşmaktadır. Güneş ışığına maruziyet, yoğun ilüminasyon veya sigaraiçimi gibi çevresel faktörler serbast radikal oluşumu aracılığı ile YBMD?den sorumluolduğu düşünülmüştür. Melatonin yapısında bulundurduğu pirol halkası nedeni ilevücutta normal fizyoljik süreçte oluşan oksidan ajanlara karşı antioksidan özellikgöstermektedir. Amfenak siklooksijenaz yolağını inhibe eden ve inflamasyon,maküla ödemi gibi önem arz eden durumlarda kullanılan bir antiinflamatuar ajandır.Bu çalışmanın amacı ARPE-19 hücrelerinde kültür ortamında, mavi ışıklaoluşturulan oksidatif stres modeline karşı Amfenak ve melatoninin LP, GSH, GSHPx,hücre içi Ca+2 salınımı, ROT düzeyleri ve apoptozis düzeyleri üzerine muhtemelkoruyucu etkilerini araştırmaktır.ARPE-19 hücreleri; Kontrol, Işık, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin olmak üzere yedi ana gruba ayrıldı.LP düzeyleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+ Melatonin,Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna göre anlamlı düzeyde düşüksaptandı (p<0.05).GSH-Px aktivitesi değerlendirildiğinde gruplar arasında herhangi bir farktespit edilmedi.GSH seviyeleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna göre anlamlı düzeydeyüksek saptandı (p<0.05).Hücre içi Ca+2 salınımı ve apoptozis düzeyleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin,Işık+Amfenak, Işık+ Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubunagöre anlamlı düzeyde düşük saptandı (p<0.05).ROT düzeyleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna göre anlamlı düzeydedüşük saptandı (p<0.05).Sonuç olarak bu çalışmada Amfenak ve melatoninin ARPE-19 hücrelerindeoksidatif stres üzerine koruyucu etkilerinin olduğu gösterilmektedir.

Investigation of Effects of Blue Light-Irradiation (405 nm), Amfenac andMelatonin on Calcium Signaling, Apoptosis and Oxidative Stress Parameters inCell Culture MediumThe most important cause of blindness in elderly people living in developedcountries is Age-Related Macular Degeneration (AMD). AMD, the pathogenesis isnot fully elucidated; today still an effective treatment and prophylaxis aren?t knownagainst it. Increased Oxidative stress status which is one of the most important actorsof AMD formation induces a progressive Retinal Pigment Epithelium (RPE)degeneration in Macula. Environmental factors such as long-term daylight exposure,intensive illumination and smoking are thought to be responsible from oxidativestress mediated AMD development. Because of containing pirol chains in itsstructure, melatonin has a very strong antioxidant effect against the oxidativemolecules occurring during the physiological process in human body. Amfenac is ananti-inflammatory drug, which inhibits cyclooxygenase pathway, is used fortreatment of serious cases such as inflammation and macular edema.The aim of this study is to investigate possible protective effects of Amfenacand Melatonin on LP, GSH, GSH-Px, intracellular Ca2+ release, ROS and apoptosislevels in cultured ARPE-19 cells in a blue light (405 nm) induced oxidative stressmodel.ARPE cells were divided into seven groups as defined; Control, Light,Amfenac, Melatonin, Light + Melatonin, Light + Amfenac and Light + Amfenac +MelatoninStatistically, LP levels; in Control, Amfenac, Melatonin, Light + Amfenac,Light + Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin groups were significantlylower than Light group (p<0.05).In the terms of GSH-Px activity, there was no significant difference betweenall groups.GSH levels; in Control, Amfenac, Melatonin, Light + Amfenac, Light +Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin groups were significantly higher thanLight group (p<0.05).Intracellular Ca2+ release and apoptosis levels; in Control, Amfenac,Melatonin, Light + Amfenac, Light + Melatonin and Light + Amfenac + Melatoninwere significantly lower than Light group (p<0.05).ROS levels; in Control, Amfenac, Melatonin, Light + Amfenac, Light +Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin groups were lower than Light group(p<0.05).As a result; in this study it is showed that Amfenac and Melatonin have aprotective effect against oxidative stress in ARPE-19 cells.