Dermabond, theracal Lc ve MTA`nın sitotoksisitelerinin ve genotoksisitelerinin invitro olarak karşılaştırılması

Abstract

Amaç:Bu çalışmanın amacı; fare fibroblast hücre hattında pulpa kaplama materyallerinden Kerr Life, TheraCal LC® ve BioMTA+ ile tıpta doku yapıştırıcı olarak kullanılan DERMABOND™'un oluşturduğu sitotoksik ve genotoksik etkilerin karşılaştırılmasıdır.Gereç ve yöntem: Bu çalışmada, pulpa kuafaj tedavilerinde kullanılan TheraCal LC®®, BioMTA+, Kerr Life ve doku yapıştırıcı olan DERMABOND™'un fare fibroblast hücrelerindeki sitotoksik etkileri 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolyum bromür (MTT) testi ile, genotoksik etkileri ise tek hücre jel elektroforezi (Comet) yöntemi ile değerlendirildi. Bunun için 24 kuyucuklu hücre plakalarının içine üretici talimatlarına göre hazırlanan test materyalleri üzerine hücre kültürü medyası ilave edildi. Elde edilen ekstratları uygun dilüsyonlarda hazırlanarak sitototoksisite deneyi için L929 fare fibroblast hücreleri üzerine eklendi. Sitotoksik etkiler 24 saat, yedi gün ve ondört gün sonra değerlendirildi. Tek hücre jel elektroforezi için ise test materyallerine mağruz bırakılan hücreler agar ile kaplanmış lamlara yayıldı ve lising çözeltisinde bekletildi. Daha sonra elektroforez tankında 25V 300 mA akım yrimi dakika süreyle uygulandı. Lamlar daha sonra floresan mikroskobunda genotoksisite açısından değerlendirildi.Bulgular:3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür (MTT) sonuçlarına göre hiçbir kuafaj materyali sitotoksik bulunmamakla beraber deney grupları karşılaştırıldığında TheraCal LC®, BioMTA+, Kerr Life ve DERMABOND™ arasındaki fark istatiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p<0.05). TheraCal LC® 24 saatlik (%86, 21), 1 haftalık (%66, 70) ve 2 haftalık (%88, 20) değerlendirmelerde hücre canlılık oranları karşılaştırıldığında diğer materyallerinden daha fazla sitotoksik etki göstermiştir. Buna karşın BioMTA+ ve DERMABOND™un sitotoksik etkili olmadıkları gözlemlenmiştir. Çalışmanın tek hücre jel elektroforezi (Comet) testi sonuçlarına göre TheraCal LC®'nin 24 saat, 1 hafta ve 2 haftalık maruziyetlerde diğer materyallere daha çok genotoksik özelliklere sahip olduğu görülmüştür (p<0.05).Sonuçlar: Elde edilen verilerle; BioMTA+, Kerr Life, DERMABOND ve vital endodontik tedavilerde kullanılabileceği, DERMABOND™'un ise sitotoksik ve genotoksik etki göstermediği gözönüne alındığında pulpa kuafaj materyallerine alternatif olabileceği düşünülmektedir. Bunun yani sıra DERMABOND™'un dentin oluşumunu uyarıp uyarmadığı ile ilgili ilave çalışmalar yapılmalıdır. Theracal LC® materyali kullanımında ise sitotoksik ve genotoksik etkileri yönünden dikkatli olunmalıdır.

Aim: The aim of this study was to compare cytotoxic and genotoxic effects of various pulp capping materials such as TheraCal LC®,BioMTA+ DERMABOND™, and Kerr Life in mouse fibroblast cell lines.Materials and methods: In this study, the cytotoxic effects of pulp capping materials TheraCal LC®, BioMTA+, Kerr Life and tissue adhesive DERMABOND™ were determined in mouse fibroblast cells using 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and genotoxic effects were determined by Single Cell Gel Electrophoresis (Comet) assay. For this purpose whole test materials were prepared according to manufacturer's instructions and placed into 24-well cell culture plates then incubated with cell culture media. Elutions were then added onto L929 mouse fibroblast cells. Cytotoxicity was evaluated at 24 hours, seven days, and fourteen days, respectively. For the Single cell gel electrophoresis assay, cells were embedded in agarose, lysed and slides were transferred to the electrophoresis tank filled with electrophoresis solution. Electrophoresis was proceeded at 25V 300 mA for twenty minutes. Cells were analyzed with a fluorescence microscope by means of genotoxicity. Results: None of the test materials showed cytotoxicity. Nevertheless, there were statistically difference among Theracal LC®, BioMTA+,Kerr Life, and DERMABOND™ (p<0.05). By means of cell viability rates, TheraCal LC® showed more cytotoxic effects than other materials in 24-hour (86.21%), 1-week (66.70%) and 2-weeks (88.20%). Single Cell Gel Electrophoresis (Comet) assay revealed that TheraCal LC® was more genotoxic pulp capping material than the other materials at 24 hours, one week, and two weeks exposures (p< 0.05).Conclusion: With the limitation of this study, although BioMTA +, Kerr Life, DERMABOND, TheraCal LC® materials might be used in vital pulp therapies safely, due to its more cytotoxic and genotoxic effect TheraCal should be used precautiously. DERMABOND™ might be considered to an alternative to pulp capping material, but further studies need to be performed to clarify whether it might be promote dentin formation.