Seminal plazmadaki anti müllerian hormonun sperm morfolojisi ve sperm DNA hasarıyla ilişkisi

Abstract

Bu tezde seminal Anti Müllerian Hormon (AMH) düzeyleri ile Kruger morfolojiksınıflamasına göre baş, boyun ve kuyruk anomalili ve normal morfolojili spermlerinkarşılaştırılması amaçlanmıştır. Ayrıca sperm DNA fragmantasyonu TerminalDeoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end labeling (TUNEL) yöntemiyle incelenmişve sonuçlar AMH düzeyleri ve Kruger morfolojisiyle karşılaştırılmıştır.Gönüllü hastalardan toplanan semen ve kan örnekleri alınmıştır. Semen analizisonuçlarına göre hastalar normozoospermi (n=46), oligoastenoteratozoospermi (n=18),azospermi (n=19), teratozoospermi (n=68) olarak dört gruba ayrılmıştır. Kan FSH, LHve Testosteron düzeyleri biyokimyasal olarak ve kan ve semen AMH düzeyleri ELISAyöntemiyle ölçülmüştür. Hastaların ejekülatlarından hazırlanan yayma preparatlarınaTUNEL boyaması yapılmıştır ve apopitotik indeks hesaplanmıştır. Elde edilen verileristatistiksel olarak değerlendirilmiştir ve p<0,05 istatistiksel olarak anlamlı kabuledilmiştir.Gruplar kendi aralarında karşılaştırıldığında sperm volümünün azospermik gruptanormozoospermik gruba göre anlamlı olarak düşük olduğu saptanmıştır (P= 0,0001).Total motil sperm sayısı, total progresif motil sperm sayısı normozoospermik gruptadiğer bütün gruplara göre istatiksel olarak fazla bulunmuştur. Hareketsiz sperm oranıoligoastenoteratozoospermik grupta anlamlı olarak en yüksek bulunmuştur. Krugermorfolojisi değerlendirmesinde baş anomalisi teratozoospermik grupta anlamlı olarakyüksek bulunmuştur (P=0,0001). Bu hastalarda baş anomalisi oranı ile TUNEL (+)hücre varlığı arasında (-) korelasyon varken, boyun ve kuyruk anomalisi arasında (+)korelasyon saptanmıştır. FSH ve LH düzeyleri azospermik grupta anlamlı olarakyüksek bulunmuştur. Kan ve semen AMH düzeyleri azospermik grupta en yüksekti veistatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur. TUNEL pozitif hücre sayısınınnormoozoospermik hastalarda yüksek çıkması, Tüp Bebek Merkezlerine gelen normalsperm parametrelerine sahip olgularda da sperm DNA hasarı olabileceğinigöstermektedir. Bu da sperm DNA kırıklarının idiopatik infertilite nedenlerinden biriolduğunun kanıtıdır. Çalışmamızda AMH'nın Kruger morfolojisi ve sperm DNAkırıklarıyla ilişkisi bulunmamıştır.

In this thesis, we aimed to compare seminal Anti Müllerian Hormone (AMH) levelswith head, neck and tail anomalies and normal morphology sperm according to Krugermorphological classification. We also analyzed the relationship between theseparameters and sperm DNA fragmentation studied by Terminal deoxynucleotidyltransferase dUTP nick end labeling (TUNEL) assay.Semen and blood samples collected from volunteer patients. According to semenanalysis results, patients were divided into four groups as normozoospermia (n=46),oligoastenoteratozoospermia (n=18), azospermia (n=19) and teratozoospermia (n=68).Blood FSH, LH and Testosterone levels were measured biochemically and blood andsemen AMH levels were measured by ELISA. TUNEL staining was performed onsmear preparations prepared from ejaculates of patients and apoptotic index wascalculated. Appropriate statistical analysis was carried out and the p-value was set to <0.05 for statistical significance.Sperm volume was significantly lower in the azoospermic group compared to thenormozoospermic group (p=0,001). Total motile sperm count and total progressivelymotile sperm count were statistically higher in the normozoospermic group than in allother groups. The immotile sperm ratio was found to be significantly higher in theoligoasthenoteratozoospermic group. In the morphological evaluation of spermperformed according to Kruger strict criteria, the head anomaly was found to besignificantly higher in the teratozoospermic group (p=0,001). A negative correlationbetween head anomaly rate and TUNEL (+) cell presence was found in these patients.Also, there was a positive correlation between neck and tail anomaly and TUNEL (+)cell presence. FSH and LH levels were significantly higher in the azoospermic group.Blood and seminal plasma AMH levels were most elevated in the azoospermic groupand were statistically significant. The high number of TUNEL positive cells innormoozoospermic patients indicates that sperm DNA damage may also occur insubjects with normal sperm parameters coming to IVF Centers. This is proof thatsperm DNA damage is one of the causes of idiopathic infertility. In our study, wecouldn't find any association between seminal plasma AMH was not associated withsperm morphology and sperm DNA damage.