İnsan karbonik anhidraz izoenzimleri (hCA I-II) üzerine 4-metilbenzensülfonamid türevlerinin inhibisyon etkisinin incelenmesi

Abstract

Karbonik anhidrazlar (CA'lar), karbondioksit ve su arasındaki reaksiyonu katalize eden metaloenzimlerdir. Bu çalışmada hCA I ve hCA II izoenzimlerinin insan eritrositlerinden saflaştırılması ve 4-metilbenzensülfonamid türevlerinin enzimlerin esteraz aktivitesi üzerine etkilerinin araştırılması amaçlandı. Bu amaçla öncelikle hCA I ve hCA II izoenzimleri insan taze kanından Sefaroz-4B-L-tirozin sülfanilamid afinite kolon kromatografisi ile saflaştırıldı. hCA I ve hCA II izoenzimleri sırasıyla 97,05 ve 468,90 kat saflaştırıldı ve %67,82, %49,27 verimle elde edildi. Daha sonra IC50 değerlerini bulmak için esteraz aktivitesi kullanılarak sülfonamid türevlerinin insan karbonik anhidraz izoenzimi I ve II üzerine inhibisyon etkileri araştırıldı ve (%) Aktivite-[Sülfonamid] grafikleri çizildi.Elde edilen grafiklerden yararlanılarak sırasıyla 1-9 numaralı sülfonamid türevlerinin hCA I ve hCA II için IC50 değerleri bulundu. hCA I-II için IC50 değerleri sırasıyla 0,770-5,196 nM ve 18,887-56,862 nM aralığındadır.

Carbonic anhydrases (CAs) are metaloenzymes that catalyze the reaction between carbon dioxide and water. In this study, it was aimed to investigate the purification of hCA I and hCA II isoenzymes from human erythrocytes and the effects of certain 4-methylbenzenesulfonamide derivatives on the esterase activity of enzymes. For this purpose, firstly, hCA I and hCA II isoenzymes were purified from human fresh blood by Sepharose-4B-L-tyrosine sülfanilamide affinity colon chromatography. The hCA I and hCA II isoenzymes were purified 97,05 and 468,90 fold and obtained with %67,82, %49,27 yield, respectively. Subsequently, the inhibitory effects of sulfonamide derivatives on human carbonic anhydrase isoenzymes I and II were investigated using esterase activity and plotted (%) Activity-[Sulfonamide] graphs to find IC50 values.Utilizing the obtained graphs, IC50 values for hCA I and hCA II of the 1-9 numbered sulfonamide derivatives were found. The IC50 values for hCA I-II are in the range of 0,770-5,196 nM and 18,887-56,862 nM, respectively.