Farelerde anjiyotensin 2 reseptör blokörü losartanın sisplatine bağlı nefrotoksisiteden koruyucu etkinliğinin değerlendirilmesi

Abstract

Çalışmamızda sisplatine bağlı gelişen nefrotoksisitede anjiyotensin 2reseptör blokörü losartanın histolojik düzeydeki koruyucu etkisi ve bu etkininapoptotik yolak ile olan ilişkisinin araştırılması amaçlanmıştır.Çalışma sağlıklı 15 adet BALB-C cinsi dişi fare ile yapıldı. Fareler üçgruba ayrıldı. Birinci gruba intraperitoneal 5 cc % 0,9'luk steril serum fizyolojiksolüsyonu enjekte edildi. İkinci gruba intraperitoneal tek doz sisplatin (12,7mg/kg/doz) verildi. Üçüncü gruba tek doz sisplatin (12,7 mg/kg/doz) verildi vesisplatin enjeksiyonundan dört gün önce losartan (10 mg/kg/gün) po başlandı vedokuz gün boyunca verildi. Sisplatin verildikten sonra beşinci günde tümdenekler servikal dislokasyon ile sakrifiye edildi. Sakrifiye edilmeden dört saatönce tübüler proliferasyonu değerlendirmek amacı ile 5-bromo 2'deoxyuridine(200 mg/kg) intraperitoneal enjekte edildi. Hayvanların karın bölgesi açılarakböbrekleri çıkarıldı. Histolojik inceleme amacıyla sol ve sağ böbrek %10'lukformaldehit içerisine alındı.Sisplatin grubu kesitleri incelendiğinde birçok tübülde kast oluşumu,tübüler tiroidizasyon, tübül epitel hücrelerinde nüklear fragmantasyon, tübülerdilatasyon izlendi. Ayrıca interstisyumda inflamatuar hücreler görüldü. Yer yerdejenere tübüller bulunmaktaydı ve bazı tübül epitel hücreleri lümenedökülmüştü. Glomerüllerde ve damarlarda konjestif değişiklikler izlendi. Bazıglomerüller atrofik özelliklere sahipti. Sisplatin+Losartan grubu kesitleriincelendiğinde ise patolojik bulguların azaldığı izlendi. Aktif kaspaz-3işaretlemesi yapılan kesitler incelendiğinde, kontrol grubunda çok az sayıdapozitif hücre bulunmaktaydı. Bu sayı sisplatin grubunda belirgin şekilde artmıştı(p<0,001). Sisplatin+Losartan grubundaki pozitif hücre sayısı sisplatin grubunagöre azalmıştı (p<0,05). Anti-5-bromo 2'deoxyuridine işaretlemesi yapılankontrol grubu kesitleri incelendiğinde pozitif boyanmış hücrelere rastlandı. Busayı sisplatin grubunda anlamlı bir şekilde azalmıştı (p<0,001).Sisplatin+losartan grubuna bakıldığında ise pozitif boyanmış hücre sayısındadiğer iki gruba oranla anlamlı bir artış görüldü (p<0,001).Bu çalışmada sisplatine bağlı nefrotoksisite oluşturulan farelerdelosartan kullanımının böbreği koruyucu, apoptozisi önleyici ve proliferasyonuartırıcı etkisi olduğu gösterilmiştir.Anahtar kelimeler: apoptozis, losartan, nefrotoksisite, sisplatin

In our study, it was aimed to investigate the protective effect ofangiotensin 2 receptor blocker losartan against cisplatin-induced nephrotoxicityin histologic level and its association with the apoptotic pathway.The study was conducted with 15 healthy BALB-C female mice. Themice were divided into three groups. The first group was injected byintraperitoneal 5 cc 0.9% sterile serum solution. The second group receivedintraperitoneal single dose cisplatin (12.7 mg / kg / dose). The third groupreceived a single dose of cisplatin (12.7 mg / kg / dose). Four days prior tocisplatin injection, losartan (10 mg / kg / day) po was administered and given fornine days for third group. All subjects were sacrificed by cervical dislocation onthe 5th day after cisplatin administration. Four hours prior to sacrifice,intraperitoneal at 5-bromo 2 deoxyuridine (200 mg / kg) was injected to evaluatetubular proliferation. The abdomens of animals were opened and their kidneysremoved. The left and right kidneys were taken into 10% formaldehyde forhistological examination.When the cisplatin group cut view was examined, it was observed thatthere were cast formation in many tubules, tubular thyroidisation, nuclearfragmentation in tubule epithelial cells and tubular dilatation. In addition,inflammatory cells were seen in the interstitium. There were degenerate tubuleslocally and some tubular epithelial cells fell into lumen. Congestive changeswere observed in glomerulus and veins. Some glomerulus had the atrophicproperties. When the cut views of the cisplatin + losartan group were examined,it was observed that the pathological findings decreased. When the cut viewswhich were marked with active caspase-3 were examined, there were very fewpositive cells in the control group. This number increased significantly in thecisplatin group (p <0.001). The number of positive cells in the cisplatin +losartan group was lower than the cisplatin group (p <0.05). When the cut viewsof control group for anti-5-bromo 2'oxyuridine markers were examined, positivestained cells were found in the control group. This number decreasedsignificantly in the cisplatin group (p <0.001). When the cisplatin + losartangroup was examined, a significant increase was observed in the number ofpositive stained cells compared to the other two groups (p <0.001).In this study, it was shown the effect of losartan administration to mice inthe state of cisplatin-induced nephrotoxicity for preserving kidney, inhibitingapoptosis and enhancing proliferation.Key words: apoptosis, losartan, nephrotoxicity, cisplatin