Kronik myolid lösemide kemik iliği stromasının morfolojik ve fonksiyonel özellikleri

Abstract

VI. ÖZET Kronik myeloid lösemi (KML), myeloid seri genişlemesi ile seyreden bir hematopoetik kök hücre hastalığıdır. Hastaların %90'ında Philadelphia (Ph) kromozomu, t(9;22) translokasyonu pozitiftir. Bu translokasyonla ortaya bcr-abl hibrid geni çıkar. Bu genin kodladığı 210 kD'luk, tirozin kinaz aktivitesindeki proteinin hastalığın patogenezinde rolü vardır. KML öncüllerinin, stromaya adhezyonlarının bozuk olduğu, stromal makrofajların Ph (+) malign klondan geldiği ve stromal ekstraselüler matriks yapısında bozukluklar olduğu bilinmektedir. Bu çalışmada, 12 KML'li hastanın ve 13 sağlıklı kontrolün uzun dönemli kültür ortamında kemik iliği mononükleer hücrelerinin oluşturduğu adheran hücre populasyonunun özellikleri incelendi. Her iki gruptan 6'şar hastanın ise 4 hafta boyunca non-adheran hücre gruplarının sayımları, immunfenotipik özellikleri ve koloni oluşturma potansiyelleri izlendi. Her iki gruptan 5'er örnekte ise oluşan stromanın hematopoetik rekonstitüsyonu desteklemesi değerlendirildi. Aynı stroma örneklerinin yarısı 50 U/ml INF- a içeren ortamda beslendi ve bu grup stroma üzerinde üreyen hematopoetik odak sayısının kontrollerden farkı araştırıldı. Sağlıklı kontrollerin ve KML'li hastaların kemik iliği mononükleer hücrelerinin; başlangıç CD34+ hücre oranlan, CFU-GM ve eritroid koloni oluşturma potansiyelleri benzerdi. KML grubunun başlangıç CFU-GEMM sayımları (2 ± 1.27), kontrol grubunun sayımlarından (11.18 ± 9.3) belirgin olarak düşüktü (p< 0.001). Kontrol grubunda 7-10. günde gözlenen hücre sayısı ve CFU-GM oluşturma potansiyelindeki artış KML grubunda gözlenmedi. ikinci haftadan itibaren kontrol grubunda non-adheran hücre populasyonunun koloni oluşturma potansiyeli hızla düşerken, KML grubunda göreli olarak CFU-GM oluşturma potansiyeli daha yüksek kaldı. Bu fark özellikle 4. haftada anlamlı farklılık gösteriyordu (p< 0.01). Morfolojik olarak konfluent stroma oluşturma oranı KML grubunda (%41.7), kontrol grubundan (%92.3) belirgin olarak düşüktü. KML stroma gelişimi tüm haftalarda kontrollerden geri kalıyordu (tüm haftalar için p< 0.05). Adventisyel retiküler hücrelerin 98oluşturduğu stromal ağ KML grubunda daha gevşek ve düzensizdi. KML stroması hematopoetik odaklardan fakirdi. Dördüncü haftanın sonunda oluşan adheran hücre populasyonu değerlendirildiğinde; KML grubunda hücreden fakir (başlangıcın %17.5'u kadar), CD34+ hücre oranı kontrol grubunun 1/7'si kadar olan, başlangıç koloni oluşturma potansiyelinin ise ancak %3.03'ünü koruyabilmiş bir stroma geliştiği görüldü. Kontrol grubunda ise adheran hücre populasyonu başlangıcın %38.4'ü kadardı ama toplam CD34+ hücre sayısı ve CFU-GM oluşturma potansiyeli oluşan stromada tümüyle korunmuştu. Üreyen adheran hücreler üzerine normal CD34+ hücreler ekilerek yapılan deneylerde ise KML stroması üzerinde normal hematopoetik rekonstitüsyonun baskılanmış olduğu görüldü. Hem kontrol hem de KML grubunda stromaların INF-a bulunan ortamla beslenmesi oluşan hematopoetik odak sayısını azalttı ama KML grubunda bu azalma daha belirgindi (p< 0.05). 99