Nonalkolik steatohepatit hastalarının periferik kan mononükleer hücre kültürlerinde TNF-alfa üretimi ve pentoksifilinin etkisi

Abstract

ÖZET NONALKOLİK STEATOHEPATİT HASTALARININ PERİFERİK KAN MONONÜKLEER HÜCRE KÜLTÜRLERİNDE TNF-ct ÜRETİMİ ve PENTOKSİFİLİN'İN ETKİSİ Giriş: Nonalkolik Steatohepatit (NASH) siroza kadar ilerleyebildi bir kronik karaciğer hastalığıdır. NASH patogenezi henüz yeterince iyi bilinmemekle birlikte, proinflamatuar sitokinlerin, özellikle TNF-a'nm önemli rol oynadığı düşünülmektedir. Amaç: Bu çalışmanın amacı; 1) histolojik olarak kanıtlanmış NASH hastalarından alman periferik kan mononükleer hücre (PKMH) kültür süpernatanında TNF-a üretimini sağlıklı kontrollerle karşılaştırarak değerlendirmek, 2) TNF-a düzeylerine bir TNF-a inhibitörü olan pentoksifîlin'in (POF) etkilerine araştırmak, 3) PKMH kültüründe TNF-a üretimini ve POF ile inhibisyonunu, hastaların demografik, laboratuar ve histolojik bulguları ile karşılaştırmaktır. Gereç ve Yöntemler: NASH hastaları ve kontrollerden alman tam kan örneklerinden PKMH ayrılarak kültür yapıldı. Lipopolisakkarid ile uyarılmış (LPS, 100 ng/mL) ve POF 10, 100, 500 j,g/mL dozları ile muamele edilip 24 saatlik inkübasyona bırakılan PKMH kültür süpernatanlarında ELISA tekniği ile TNF-a düzeyi belirlendi. Elde edilen TNF-a düzeyleri ile NASH hastalarının demografik, laboratuar ve histolojik bulguları karşılaştırıldı.İstatistiksel incelemede student's t testi, yinelenmiş ölçümler için ANOVA ve Pearson testleri kullanıldı. Bulgular: Çalışmaya 13 NASH hastası ve 6 kontrol alındı. PKMH kültürlerinde spontan TNF-a üretimi NASH hastalarında 580.6+ 657.96 pg/mL, kontrollerde ise 295.95± 328.56 pg/mL bulundu (p>0.05). LPS ile uyarı sonrasında her iki grupta da en yüksek TNF-a değerlerine ulaşıldı (NASH hastalarında 1752+ 685.42 pg/mL, kontrollerde 1895.6+ 623.12 pg/mL, p>0.05). Kuyulara ilave edilen POF dozları ile paralel olarak, süpernatanlardaki TNF-a miktarı süprese oldu. (Her POF dozu arasında TNF-a üretimi farkı için p<0.0001). En yüksek POF dozu olan 500 ug/mL ile NASH hastalarında % 91, kontrol hastalarında % 96 TNF-a üretiminde süpresyon sağlandı (p>0.05). Serum AST, ALT, alkalen fosfataz, GGT, trigliserid ve ferritin düzeyleri ile TNF-a miktarı arasında bir korelasyon bulunamadı. Benzer şekilde hastaların yaş, cinsiyet, vücut kütle indeksi gibi demografik verileri ve karaciğer histoloji bulguları ile TNF-a düzeyleri arasında da bir korelasyon yoktu. Sonuçlar: PKMH kültürlerinde LPS 'e bağlı olarak hem NASH hem kontrol grubunda TNF-a stimulasyonu olmaktadır. POF, NASH hastalarının PKMH kültürlerinde LPS ile uyarılmış TNF-a üretiminde kontrol olgularına benzer şekilde, doza bağımlı süpresyon yapmaktadır. Hastaların demografik, laboratuar ve histolojik bulguları ile PKMH süpernatanlarındaki TNF-a miktarı arasında bir korelasyon bulunmamaktadır. Elde ettiğimiz in vitro bulgular, POF 'un NASH 'debir tedavi seçeneği olarak derlenebileceği in vivo çalışmalara ışık tutabilir.