Sıçanda jejunal flep modelinde prostasiklin ve iskemik ön koşullandırmanın iskemi reperfüzyon hasarı üzerine etkisi

Abstract

ÖZETAmaç: Jejunal flep özofagus rekonstrüksiyonunda en sık kullanılan fleplerden biridir.Ancak jejunum flebinin aktarımı sırasında görülen sıcak iskemi ve devamındareperfüzyon hasarı flebin kullanımını kısıtlamaktadır. Çünkü jejunum vücuttaiskemiye en duyarlı organlar arasındadır. Jejunal flep ile özofagusrekonstrüksiyonunun en sık görülen komplikasyonlardan olan fistül oluşumu vestenozun etiyolojisinde flebin maruz kaldığı iskemi-reperfüzyon (I/R) hasarıgösterilmektedir. Bu çalışmada amaç bir prostasiklin analoğu olan iloprost ile iskemikön-koşullandırma modalitelerinin I/R hasarı üzerine etkilerini araştırmak ve bu ikimodaliteyi karşılaştırmaktı.Yöntem: 34 adet Sprague-Dawley sıçan randomize olarak 5 gruba ayrıldı. Orta hatlaparotomisi yapıldı, Treitz ligametinin yaklaşık 15 cm distalinde 5-7 cm uzunluğundajejunal bir segment besleyen damarlar ile jejunal flep şeklinde hazırlandı. Shamgrubunda flep hazırlandıktan sonra biyopsiler alındı.0p Kontrol ve iskemik önkoşullandırma(ÖK) grubuna SF, iloprost (ILO) ve iloprost+iskemik ön-koşullandırma(ILO+ÖK) grubunda 1 mcg/kg iloprost iv bolus enjekte edildi. Jejunal flep pedikülüatravmatik mikrovasküler klemp ile klemplendi ve 60 dakika iskemi, 2 saatreperfüzyon uygulandı. Flep perfüzyonu lazer Doppler flowmetri ile değerlendirildi.Bağırsak biyopsisi hemotoksilen ve eozin ile boyandı ve Chiu skorlama sistemi iledeğerlendirildi. Diğer biyopsiler homojenize edildi ve spektrofotometrik yöntemlesüperoksit dismutaz (SOD) ve miyeloperoksidaz (MPO) enzimlerinin seviyesi tayinedildi.Bulgular: ILO, ÖK, ILO+ÖK gruplarında mukozal hasarın kontrol grubuna göre dahaaz olduğu ve mukozal perfüzyonunun post-iskemik dönemde kontrole göre dahayüksek değerlere ulaştığı görüldü. (p<0.05) ILO grubunun histolojik skoru ÖKgrubundan daha iyidi. ILO, ÖK, ILO+ÖK gruplarında antioksidan enzim SODmiktarının arttığı, inflamasyon parametresi olan MPO'nun azaldığı tespit edildi.Sonuç: İloprost ve iskemik ön-koşullandırma jejunal flepte iskemi-reperfüzyonsonrası flep perfüzyonu arttırmış ve mukozal hasarı azaltmıştır. Bu çalışmadan eldeedilen olumlu sonuçlar ileride iloprost ya da iskemik ön-koşullandırma yöntemlerininjejunal flebi iskemiye hazırlamada kullanımına zemin hazırlamaktadır.

ABSTRACTObjective: Free jejunal flap is one of the most common used flaps foresophageal reconstruction. However, ischemia-reperfusion (I/R) injury due towarm ischemia seen during the transfer limits its use. Because jejunum is oneof the organs that are least tolerant to ischemia. I/R injury was pointed out inthe etiology of fistula formation and stenosis, which are among the mostcommonly observed complications of esophageal reconstruction with freejejunal flap. The goal of this study was to evaluate the effects of iloprost (asynthetic prostacyclin analogue) and ischemic pre-conditioning on intestinalI/R injury and to compare the effectiveness of these two modalities.Method: 34 Sprague-Dawley rats were randomized into 5 groups. A midlinelaparotomy performed and a 5-7 cm long jejunal segment 15 cm distal to theTreitz ligament was isolated with its supplying vessels. Biopsies were taken inthe sham group after the jejunal flap was prepared. In the other groups, EJVwas cannulated through the neck incision. Before ischemia, 1 mcg/kg normalsaline or iloprost was injected as iv bolus in control, ischemic pre-conditioning(PC) or iloprost (ILO), iloprost+ischemic pre-conditioning (ILO+PC) groups,respectively. The vascular pedicle of jejunal flap was clamped for 60 min by anatraumatic microvascular clamp. Following ischemia, the clamp was removedand the flap was perfused for 2 hours. Flap perfusion was asseses by laserdoppler flowmetry. Intestinal tissue segments were stained with hematoxylinand eosin and evaluated using Chiu scoring system. Other flap segments werehomogenized and assesses for superoxide dismutase (SOD) andmyeloperoxidase (MPO) levels via spectrophotometry.Results: Animals in groups ILO, PC and ILO+PC following I/R injury hadsignificantly better post-ischemic recovery of mesenteric perfusion andsignificantly less mucosal injury compared to the control group. The histologicscore of ILO group was better than PC. In treatment groups (ILO, PC, ILO+PC)the levels of the antioxidant enzyme, SOD, were increased and that of MPO,one of inflammatory markers, were reduced.Conclusion: According to the results of this study, iloprost and ischemic preconditioningincreased the mucosal perfusion and reduced the mucosal injuryof jejunal flap following ischemia and reperfusion. Iloprost or ischemic preconditioningmight be considered as a treatment strategy in the future to reduceI/R injury of jejunal flaps.