Domuzların myometrium kontraksiyonlarına in vitro koşullar altında denaverinhydrochloridin etkisi

Abstract

ÖZET Bu çalışmada domuzların myometrium kontraksiyonlanna in vitro koşullar altında Denaverinhydrochloridin etkisi araştırıldı. Araştırmanın devamında da Denaverinhydrochlorid uterusta hangi rezeptörler üzerinde etki oluşturduğu saptandı. Materyal toplama işlemi Munich mezbahasından sabahlan 6 ve 7 saatleri arasında yapıldı. Hayvanların kesiminden 20 dakika sonra gövde açılıp uterus, ovaryumlarla birlikte alındı ve özel besi solüsyonu içerisinde 37°C de yaklaşık 45 dakika içerisinde laboratuvara nakledildi. Araştırmada kullanılan 80 adet domuz uterusu Proöstrus, Östrus, Metöstrus ve Diöstrus devrelerinde bulunuyorlardı. Domuzların seksüel siklus devreleri makroskopik ovaryum bulgularına göre saptandı. Denaverinhydrochlorid ilk önce yanlız başına myometrium preparatl arının spontan kontraksiyonlan esnasında organ banyosunun akışında besi solüsyonu içerisine 4xl0-9mg/ml den 4xl0-4mg/ml' ye kadar olan konsantrasyonlarda verildi. Denaverinhydrochloridin uygu lanmasından sonra spontan kontraksiyonların hem amplitüdü ve hemde frekansı azaldı. Bu etkiler doza bağlı olarak bütün araştırma devrelerinde (Proöstrus, Östrus, Metöstrus, Diöstrus) saptandı. Denaverinhydrochloridin etkisi ortadan kalktıktan sonra bütün konsantrasyon sahalarında normal spontan kontraksiyonlar tekrar ortaya çıktı. Denaverinhydrochloridin etki mekanizmasını açıklamak ve hücre membranlannda bağlandığı yeri araştırmak amacıyla bu madde bilinen spesifik adrenorezeptör blokeri maddeler ile birlikte uygulandı. Alfa-antagonistlerin uygulanmasından sonra spontan kontraksiyonlar tamamıyla durdu. Daha sonra Denaverinhydrochlorid 4xl0-9mg/mr den 4xlO-7mg/mV ye kadar yükselen dozlarda besi solüsyonu içerisine verildi. Bu esnada Denaverinhydrochlorid, alfa-antagonistlerin bloker etkisini değiştirmedi. Bu araştırma düzeninde33 Dihydroxybetizyl- amin (DHBA) besi solüsyonu içerisine yükselen dozlarda verildi. Böylece kontraksiyon faaliyetleri 3,4-DHBA tarafından bütün araştırma düzenlerinde tekrar ortaya çıkartılabildi. Beta-antagonistlerin uygulanmasından sonra spontan kontraksiyon faaliyetlerinde bir yükselme meydana gelmedi. Daha sonra Denaverinhydrochlorid 4xlO-9mg/mT den 4x1 0-7 mg/ml' ye kadar yükselen dozlarda besi solüsyonu içerisine verildi. Denaverinhydrochlorid ile beta-antagonistlerin etkisi altındaki myometriumda bloke olmuş beta-rezeptörler aktive edilebildi.

34 7. ZUSAMMENFASSUNG In dieser vorliegenden Arbeit wurde die Wirkung von Denaverinhydrochlorid unter in vitro Bedingungen auf die Myometriumkontraktionen von Schweinen untersucht Im weiteren wurde versucht zu erklaren, über welche Rezeptoren Denaverinhydrochlorid seine Wirkung entfaltet. Die Materialsammlung erfolgte am Schlachthof München morgens zwischen 6 und 7 Uhr, Innerhalb von Zwanzig Minuten nach Tötung der Tiere wurde der Uterus mit Ovarien entnommen, Und in einer Nâhrlösung von 37°C innerhalb von 45 Minuten ins Labor transportiert. Die Untersuchungen wurden an Myometriumstreifen von 80 Schlachtschweinen durchgefuhrt Diese Tiere wurden in der Proöstrus-, Östrus-, Metöstrus- und Diöstrusstadium untersucht. Das Zyklusstadium der Schweine wurde anhand der makroskopisch erhobenen Ovarbefunde bestimmt Denaverinhydrochlorid wurde zuerst selbststandig wahrend Spontankontraktionen von Myometriumstreifen am Einlauf des Organbades der Nâhrlösung in Konzentrationen von 4xl0`9 mg/ml bis 4xl0~4 mg/ml zugegeben. Nach der Applikation von Denaverinhydrochlorid fiel sowohl die Kontraktionsamplitude als auch die Kontraktionsfrequenz ab. Diese Wirkungen wurden dosisabhangig in alien untersuchten Phasen (Proöstrus, Östrus, Metöstrus, Diöstrus) festgestellt. Nach der Wirkung von Denaverinhydrochlorid konnten in allen Konzentrationsbereichen in reiner Nâhrlösung wieder normale Kontraktionen auftreten. Um den Wirkungsmechanismus von Denaverinhydrochlorid und seinen Bindungsort an der Zellmembran zu untersuchen, wurde Denaverinhydrochlorid mit den bekannten Rezeptorantagonisten zusammen appliziert.35 Nach der Zugabe von alhpa-Antagonisten wurden die Spontankontraktionen völlig gehemmt. Danach wurde Denaverinhydrochlorid in steigenden Dosen von 4x10`^ mg/ml bis zur einer Konzentration von 4x1 0`? mg/ml der Nahrlösung zugesetzt. Die blockierende Wirkung von alhpa-Antagonisten konnte von Denaverinhydrochlorid nicht verandert werden. In dieser Untersuchungsordnung wurde 3,4-Dihydroxybenzylamin (DHBA) der Nahrlösung in steigenden Dosen zugegeben. Die Kontraktionstatigkeiten konnten in allen Untersuchungsordnungen von 3,4-DHBA vvieder auftreten. Nach dcr Zugabe der beta-Antagonisten kam es bei den Spontankontraktionstatigkeiten zu keiner Steigerung. Danach wurde Denaverinhydrochlorid in steigenden Dosen von 4x1 0`9 mg/ml bis zur einer Konzentration von 4x1 0`^ mg/ml der Nahrlösung zugesetzt. DuTch Denaverinhydrochlorid konnten unter der Wirkung von beta-Antagonisten am Myometrium blockierende beta-Rezeptoren aktiviert werden.