Show simple item record

dc.contributor.advisorKoçyiğit, Abdürrahim
dc.contributor.authorGüler, Eray Metin
dc.date.accessioned2020-12-07T07:49:17Z
dc.date.available2020-12-07T07:49:17Z
dc.date.submitted2019
dc.date.issued2020-06-12
dc.identifier.urihttps://acikbilim.yok.gov.tr/handle/20.500.12812/109832
dc.description.abstractKanser, dünya çapında önemli bir halk sağlığı sorunudur. Kolon kanseri, gelişmişülkelerde kadınlarda ve erkeklerde sırasıyla 2 ve 3. sırada yer alan en yaygın görülenkanser türlerinden biridir. Kolon kanserinde rutin tedavi olan 5-Fluorouracil'in (5-FU)%30 başarısı alternatif tedavi yöntemleri arayışına neden olmuştur. Son yıllardabitkisel kaynaklı doğal etken maddelerin kanser tedavisi üzerinde etkileri yanındakonvansiyonel tedavilerle kombine edilmesi ile ilgili araştırmalar yoğunlaşaraksürmektedir.Bu çalışmada amacımız, rutin tedavide kullanılan 5-FU ile Nigella sativa'nın etkenmaddesi Timokinon'nun (TQ) kolon kanseri üzerine kombine tedavisinin sitotoksik,genotoksik, apoptotik ve anti-kanser etkilerinin in vitro ve in vivo yöntemlerlearaştırılması ve olası etki mekanizmaların aydınlatılmasıdır.Kolon kanser hücrelerine (LoVo) ilk olarak transfeksiyon ile Lusiferaz geni transfekteedildikten sonra hücre kültürü ortamında farklı konsantrasyonlarda TQ, 5-FU vekombinasyonlarına maruz bırakıldı. 24 saat inkübasyondan sonra ATP yöntemiyleluminometrik olarak sitotoksisite, comet assay yöntemi ile DNA hasarı, luminometrikyöntem ile hücre içi glutatyon düzeyi, florometrik yöntem ile mitokondriyal membranpotansiyeli, akridin turuncusu/etidyum bromür boyası ile floresans mikroskoptaapoptoz, annexin V-FITC boyası ile akış sitometrisinde apoptoz, pro-apoptotik ve anti-apoptotik proteinlerin ekspresyonu western blot yöntemiyle çalışıldı. Kontrol, TQ, 5-FU ve kombine olmak üzere beş grup nude fareye transfekte LoVo hücreleri zenograftyöntem ile subkutan olarak enjekte edildi. 3 hafta sonra oluşturulan tümörlerintedavisine geçilip, yalnız TQ, yalnız 5-FU ve kombine gruplarına 3 hafta boyuncatedavi uygulandı. Tedavi sonucunda in vivo canlı hayvan görüntüleme sistemi vekumpasla tümör boyutları ölçüldü. Ayrıca tedavi bitiminde alınan kanlarda oksidatifstres ve enflamasyon belirteçleri incelendi. Alınan doku örneklerinde de büyümefaktörleri ve vaskülerizasyon belirteçleri incelendi.In vitro ortamda LoVo hücreleri üzerinde TQ ve 5-FU ile yapılan tekli terapiye görekombine terapilerin, tekli tedaviye göre düşük dozlarının sitotoksisiteyi, DNAhasarını, apoptozu ve hücre içi reaktif oksijen türlerinin düzeylerini arttırırken,mitokondriyal membran potansiyelini ve glutatyon düzeylerini düşürdüğü tespitedilmiştir. Ayrıca anti-apoptotik protein olan Bcl-2 ekspresyonu düşerken apoptotikproteinler Bax, Kaspaz-3, Kaspaz-9, P-53 ve P-21'in protein ekspresyonu artmıştır.Zenografik yöntemle oluşturulan in vivo kolon kanserinde ise kombine tedavinin tekliterapilere göre daha etkili olduğu bulunmuştur. Tümör boyutu küçülürken, dokudaTGFβ1 düzeyi ve vaskülerizasyon belirteci VEGF düzeyleri azalmıştır. Tedavi sonrasıalınan plazmalarda pozitif kontrole göre oksidatif stres düzeyleri düşmüştür.Elde ettiğimiz veriler, rutin tedavide kullanılan 5-FU yanında bitkisel kökenli TQ'nunkombine kullanımının hem in vitro hem de in vivo oluşturulan kolon kanserinde anti-tümör etkilerini arttırdığını ve tedaviye bağlı yan etkileri azalttığını göstermektedir.
dc.description.abstractCancer is a major public health issue worldwide. In developed countries, colon canceris the 2nd most common observed type of cancer in women and the 3rd most commonin men. The 30% success of 5-FU, which is a routine treatment for colon cancer, hasled the researchers to seek different treatment modalities. Therefore, plant-derivednatural substances have become the target of a significant amount of attention. Inrecent years, increasing efforts have been made to discover the effects of combinedplant-derived substances with conventional therapy methods on cancer.This study aimed to investigate the cytotoxic, genotoxic, apoptotic, and anti-cancereffects of thymoquinone – the active ingredient of Nigella sativa – and 5-Fluorouracilin combination against in vitro and in vivo colon cancer while illuminating possibleaction mechanisms.Initially, Luciferase transfection was performed in LoVo colon cancer cells to whichTQ, 5-FU, and combinations of different concentrations were given, and they wereincubated for 24 hours. Luminometric cytotoxicity by ATP method, DNA damage bycomet assay, luminometric intracellular glutathione level, fluorometric mitochondrialmembrane potential, apoptosis by fluorescence microscopy with acridineorange/ethidium bromide dye, apoptosis in flow cytometry by annexin V-FITC dye,expression of pro-apoptotic and anti-apoptotic proteins with western blot method havebeen investigated. Transfected LoVo cells have been injected subcutaneously to fivegroups of nude mice for the following: control, TQ, 5-FU, and combined. 3 weeks oftreatment with TQ, 5-FU, and combined therapy have been initiated 3 weeks after theinjection. At the end of this period, tumor size was measured with the IVIS device andcaliper. Also, oxidative stress and inflammation markers were examined in blood andgrowth factors, and vascularization markers were examined in tissue samples at theend of the treatment.Compared to the monotherapy with TQ and 5-FU on colon cancer, combined treatmenthas been found in low doses to increase cytotoxicity, DNA damage, apoptosis andintracellular reactive oxygen species in the cell culture studies, while decreasingmitochondrial membrane potential and glutathione levels. Also, the expression ofapoptotic proteins Bax, Caspase-3, Caspase-9, p53, and p21 increased while the anti-apoptotic protein Bcl-2 expression decreased. Combination therapy was found to bemore effective than mono therapies in vivo colon cancer, which was formed by thexenographic method. While tumor size decreased, TGFβ1 levels and VEGF levels – avascularization indicator – were decreased in the tissue. In the plasma taken aftertreatment, oxidative stress levels decreased compared to the positive control group.According to the data obtained through this study, in colon cancer TQ has been foundto increase the anti-tumor properties of the routine therapy of 5-FU in vitro and in vivowhile diminishing the side effects profile.en_US
dc.languageTurkish
dc.language.isotr
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rightsAttribution 4.0 United Statestr_TR
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.subjectBiyokimyatr_TR
dc.subjectBiochemistryen_US
dc.subjectOnkolojitr_TR
dc.subjectOncologyen_US
dc.titleKolon kanseri hücreleri üzerine timokinon ve 5-fluorouracilin terapotik etkisinin in vitro ve in vivo araştırılması
dc.title.alternativeIn vitro and in vivo investigation of the therapeutic effect of thymoquinone and 5-fluorouracil on colon cancer cells
dc.typedoctoralThesis
dc.date.updated2020-06-12
dc.contributor.departmentTıbbi Biyokimya Anabilim Dalı
dc.subject.ytmNeoplasms
dc.subject.ytmColonic neoplasms
dc.subject.ytmThymoquinone
dc.subject.ytmFluorouracil
dc.subject.ytmNigella sativa L.
dc.subject.ytmAntineoplastic agents
dc.identifier.yokid10221677
dc.publisher.instituteSağlık Bilimleri Enstitüsü
dc.publisher.universityBEZM-İ ÂLEM VAKIF ÜNİVERSİTESİ
dc.identifier.thesisid575258
dc.description.pages206
dc.publisher.disciplineDiğer


Files in this item

Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record

info:eu-repo/semantics/openAccess
Except where otherwise noted, this item's license is described as info:eu-repo/semantics/openAccess