Gökkuşağı alabalıklarında (Oncorhynchus mykiss) Renibacterium salmoninarum`akarşı aşı geliştirilmesi

Abstract

Bu çalışmada gökkuşağı alabalıklarında (Onchorhynchus mykiss)bakteriyel böbrek hastalığına (BKD) neden olan Renibacterium salmoninarum'a karşı DNA aşısı geliştirilmesi amaçlanmıştır. Balıklar çalışmada kullanılan 9 adet 100 L'lik akvaryuma 40'er adet stoklanmıştır. DNA klonu oluşturulan MSA1 ve P22 genleri balıklara 150ng/µl/balık olacak şekilde intraperitonal olarak vurulmuştur. Çalışmanın 7 ve 30. günlerinde balıklardan kan ve doku örnekleri alınarak bağışıklık parametrelerinde meydan gelen değişimler incelenmiş ve buna ek olarak 30. gün sonunda balıklara R. salmoninarum patojeni ile kontrol testlerinetabi tutulmuştur, yaşama oranları süregelen 21 gün boyunca tespit edilmiştir. Deneme sonunda immünolojik yanıtlar incelendiğinde IL-1β, IL-8, IL-10, IL-12,IL-6, COX2, TGF-β, IgM, iNOS ve MHC2 gen sumun sonuçlarına göre MSA1 ve P22 genlerinin çalışmanın yedinci gününde kontrol grubuna göre attığı tespit edilmiştir (P<0,05). ORP ve MPO aktiviteleri ise 7. ve 30. günlerde deneme gruplarında kontrol grubuna göre artış gözlenmiştir.LYS aktivitelerinde bir değişiklik gözlenmemiştir. Gökkuşağı alabalıklarında farklı iki DNA bazlı aşı ile aşılanmaları sonucunda yaşama oranlarında değişiklik gözlenmemiş olması ile birlikte P22 ve MSA1gen sunumlarının özellikle bağırsak ve dalakta artış göstermiş olması uygulamanın immunostimulant etki gösterdiğini kanıtlamıştır.

In this study, it was aimed to develop a DNA vaccine against Renibacterium salmoninarumwhich causes bacterial kidney disease (BKD) in rainbow trout (Onchorhynchus mykiss). 40 Fish per tank were stocked into 9 tanks (100 L each). MSA1 and P22 genes were cloned and injected to fish intraperitoneally with the rate of 150ng/µl/fish.On the 7th and 30th days of the study, blood and tissue samples were taken from the fish and the changes in the immune parameters were examined. Additionally, at the end of the 30th day, the fish were subjected to challenge test with R. salmoninarum pathogen and their survival rates were determined for the following 21 days. At the end of the experiment, when the immunological responses were examined, MSA1 and P22 gene expressions were enhanced (P<0.05) in comparison with control group according to results of IL-1β, IL-8, IL-10, IL-12, IL-6, COX2, TGF-β, IgM, iNOS and MHC2 gene expressions. On the other hand, ORP and MPO activities were increased on the 7th and 30th days of the study compared to control group. No change in LYS activities was observed. Although there was no change in the survival rates of the fish vaccinated with two different DNA-based vaccines, P22 and MSA1 gene expressions were increased particullary in spleen and intestine, showing immunostimulating effect of the current application.