Oral laktik asit bakterilerinin biyofilm ve halitosis üzerine etkilerinin in vitro araştırılması

Abstract

Çocuklarda oral biyofilmin mekanik olarak temizlenmesindeki zorluklar ve buamaçla kullanılan kimyasalların bazı yan etkilere sahip olması probiyotik terapiyi önplana çıkarmıştır. Bu çalışmada özellikle çocukların ağız sağlığını geliştirmeye yöneliketki sağlayacak antiadezyon, antibiyofilm aktivitelerine sahip, halitosis üzerine etkili oralprobiyotiklerin tanımlanması amaçlanmıştır. Bu amaçla sağlıklı çocukların dişyüzeylerindeki biyofilm oluşan bölgelerden alınan örneklerin fakültatif anaerobik bakterive maya çeşitliliği ortaya çıkarılmıştır. Bakteriler 16S rRNA gen dizisine göre, mayalarVitek-2 sistemi ile biyokimyasal olarak tanılanmıştır. Lactobacillus sp. olarak tanılananizolatların gastrointestinal şartlarda hayatta kalma oranları, antibiyotik duyarlılığı,antioksidan ve enzim aktivitesi, agregasyon aktiviteleri, antimikrobiyal aktivitesi,biyofilm oluşturma özellikleri belirlenmiştir. Seçilen laktik asit bakterilerinin tükürükkaplı hidroksiapatit disklerde antiadezyon ve antibiyofilm aktiviteleri incelenmiştir. 16SrRNA dizi analizi sonucunda mikrobiyal kompozisyonda Firmicutes (%83,4) baskınfilum, Lactobacillus ise baskın cins olarak tanımlanmıştır. Bu cins içinde L. rhamnosus,L. fermentum, L. paracasei, L. casei, L. plantarum ve L. salivarus türleri tanılanmıştır.Proteobacteria filumunda Neisseria, Actinobacteria filumunda Rothia baskın cinslerolarak tanılanmıştır. Maya izolatları arasında Candida dubliniensis baskın olan türolmuştur. Laktik asit bakterilerinin gastrointestinal şartlara dirençli oldukları,antioksidan, agregasyon aktiviteleri gösterdikleri, biyofilm üreticisi olduklarısaptanmıştır. Ancak seçilen oral mikroorganizmalara karşı antimikrobiyal aktivitegöstermedikleri belirlenmiştir. Seçilen bazı laktik asit bakterilerinin antiadezyon veantibiyofilm aktivitesi gösterdiği saptanmıştır. Duyusal analiz sonuçlarına göre L.rhamnosus LAB1.2.A'nın halitosis üzerine etkili olabileceği saptanmıştır.

Difficulties in the mechanical cleaning of oral biofilm in children and some sideeffects of the chemicals used for this purpose have highlighted probiotic therapy. The aimof this study was to determine the oral probiotics which have antiadhesion, antibiofilmactivity and effects on halitosis. For this purpose, facultative anaerobic bacteria and yeastdiversity of the samples taken from the biofilm areas on the tooth surfaces of healthychildren were revealed. Bacteria were identified according to the 16S rRNA genesequence and yeasts were biochemically identified by Vitek-2 system. Survival rates atgastrointestinal conditions, antibiotic susceptibility, antioxidant activity, aggregationactivities, antimicrobial activity and biofilm forming properties of isolates whichidentified as Lactobacillus sp. were determined. Antiadhesion and antibiofilm activitiesof selected lactic acid bacteria on saliva coated hydroxyapatite discs were investigated.As a result of 16S rRNA sequence analysis, Firmicutes (83.4%) was the predominantphylum in the microbial composition and Lactobacillus was defined as the dominantstrain. In this genus, L. rhamnosus, L. fermentum, L. paracasei, L. casei, L. plantarum veL. salivarus species were identified. Neisseria in Proteobacteria phylum, Rothia inActinobacteria phylum was identified as predominant genus. Candida dubliniensis wasfound to be the dominant species among yeast isolates. Lactic acid bacteria were foundto be resistant to gastrointestinal conditions, showed antioxidant and aggregationactivities and were biofilm producers. However, they did not have antimicrobial activityagainst selected oral microorganisms. Some selected lactic acid bacteria showedantiadhesion and antibiofilm activity. According to the results of organoleptic analysis, itwas determined that L. rhamnosus LAB1.2.A could be effective on halitosis.